雷公藤提取物

雷公藤提取物为卫矛科雷公藤属植物雷公藤及东北雷公藤的根、叶、花及果实提取物，主要活性成分有二萜类、三萜类和生物碱类,这些活性成分同时也是毒性成分。其中二萜类成分毒性最大, 其次是三萜类成分, 生物碱成分毒性较小。二萜类主要对心、肝、骨髓、胃肠系统、生殖系统有强烈毒性；生物碱则主要损害肝脏, 对生殖系统也有较强的毒性。雷公藤提取物及其制剂可抑制器官移植的免疫排斥反应, 治疗自身免疫性疾病, 且神经形态、功能恢复良好；具有抗炎、抗肿瘤、免疫调节及抗生育等作用, 被广泛用于治疗类风湿关节炎、肾小球肾炎红斑狼疮等自身免疫性疾病及各种皮肤病。本信息是由Chemicalbook的侍艳编辑整理。 【基源】为卫矛科雷公藤属植物雷公藤及东北雷公藤的根、叶、花及果实。雷公藤属全世界4种，中国产4种，3种入药。
【别名】黄藤，黄藤根，黄藤木，黄藤草，黄药，水莽草，水莽兜，水莽藤，水脑子根，红药，红紫根，菜虫药，蝗虫药，横虫药，断肠草，烂肠草，八步倒，山砒霜，菜仔草，茅子草，南蛇根，三棱花，旱禾花，蜡心门等。
【生境与发布】生于山地林内阴湿处或阴湿山坡、山谷或溪边灌丛。分布于长江以南，安徽、浙江、福建、台湾、江西、湖南、广东以至西南各省。
【植物形态】藤状灌木，高2～3m。小枝棕红色，具4～6棱，密生长圆形的瘤状皮孔及锈褐色短绒毛。单叶互生，近革质，叶柄长达8mm;叶片椭圆形至宽卵形，先端渐尖，基部圆或宽楔形，边缘有细锯齿，长4～10cm，宽3～5cm，上面光滑，下面主脉和侧脉有稀疏锈色短柔毛。聚伞状圆锥花序顶生及腋生，长5～7cm，被锈毛;花杂性，绿白色，5数，花萼5浅裂，雄蕊生于浅裂内凹处;子房三角形，不完全3室，每室有胚珠2，通常仅1枚发育，柱头6浅裂。蒴果长圆形，长约1.5cm，宽约1cm，黄褐色，具3片膜质翅，翅上有斜生侧脉。种子1粒，细柱状。花期5～6月，果期8～9月。

图1为雷公藤 目前已从雷公藤中分离出200多种单体化合物，主要有生物碱类，如雷公藤碱 (Wilforine)、雷公藤定碱(Wilfordine)、苯乙烯南蛇碱(Celacinnine)等;二萜类如雷公藤素甲 (Triptolide)、乙 (Tripdiolide)、丙 (Tripterolide) 及雷藤酮 (Triptonide)、山海棠素 (Triptophenolide)等;三萜类如雷公藤内酯甲、乙(Wilforlide A、B)、雷公藤红素(Tripterine，又称南蛇藤醇Celastrol) 等; 倍半萜类如雷藤素 (Wilfornide);甙类如雷公藤多甙 (雷公藤总甙GTW) 等。此外尚含有葡萄糖、果糖、有机酸、鞣质、色素等。
1.雷公藤内酯(Triptolide)：异名雷公藤甲素、雷公藤内酯醇。分子式C20H24O6，分子量 360.39。无色结晶(二氯乙烷-乙醚)，mp.227℃～228℃，[α]D25-154°(C=0.369，二氯甲烷)。
2.雷公藤羟内酯(Tripdiolide)：异名雷公藤乙素、雷公藤内酯二醇。分子式C20H24O7，分子量376.39。无色结晶(二氯甲烷-乙醚)，mp.226℃～228℃(210℃～211℃)。[α]D25-138° (C=0.139，二氯甲烷)。
3.雷公藤羰内酯(Triptonide)：异名雷公藤酮、雷公藤内酯酮。分子式C20H22O6，分子量 358.38。无色结晶(二氯甲烷-乙醚)，mp.252℃～253℃，[α]D25-175°(C=0.148，氯仿)。

图2为结构式 1.对中枢神经系统的作用
雷公藤醋酸乙酯提取物对实验小鼠中枢神经系统无明显兴奋作用，但能明显减弱戊巴比妥钠及水合氯醛对中枢神经系统的作用。
2.对心血管系统的影响
雷公藤醇提取液给兔腹腔注射ip相当于生药6克/千克，可使血压下降2.67kpa (20mmHg)，同时伴呼吸减慢、变浅。加大剂量 (连续分次ip9，15、15克/千克)可使血压由 16kpa (120mmHg ) 降至 5.33kpa (40mmHg)，并出现潮式呼吸，当ip剂量至29克/ 千克时可使血压骤降，心电图亦严重心律不齐。在位兔心ip醇提取液(9克/千克)后，心脏收缩振幅变小，出现一过性心搏不齐，半小时后可恢复。小剂量醇提取液对豚鼠离体心房有兴奋作用，持续作用达半小时以上。雷公藤还有使周围小动脉舒张及血流量增加，改善心功能与微循环作用。
3.杀虫与抑菌作用
雷公藤醇浸液及醚提取物均能杀灭蝇、蛆、梨叶星毛虫及卷叶虫等害虫。雷公藤去皮根的醋酸乙酯提取物(T1)、总生物碱、雷公藤红素对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌及607分枝杆菌有抑制作用。
4.对平滑肌的作用
雷公藤醇提取液对兔子宫平滑肌有兴奋作用，可使在位子宫收缩加强。亦可兴奋豚鼠肠平滑肌，使离体回肠收缩加强。
5.抗炎作用
雷公藤提取物对大鼠蛋清性、甲醛性及佐剂关节炎有明显抑制作用。雷公藤总甙、总生物碱的抗炎作用与生药相同。临床报告，去生物碱雷公藤煎剂的抗炎疗效不变，而胃肠道副作用减轻，认为雷公藤总甙是雷公藤主要抗炎有效成分。雷公藤或雷公藤酮可提高血浆皮质酮含量，降低大鼠肾上腺胆固醇含量，降低大鼠肾上腺胆固醇含量。对单侧肾上腺切除的大鼠雷公藤可促进其对侧肾上腺代偿性肥大。雷公藤醋酸乙酯提取物可明显降低大鼠肾上腺维生素C含量，这种作用可被地塞米松和戊巴比妥钠阻断。临床上应用雷公藤醋酸乙酯提取物治疗类风湿关节炎，治疗有效的患者尿中17-羟皮质类固醇含量显著升高。
6.对免疫功能的影响
(1)对细胞免疫的影响 以刀豆蛋白 (ConA)诱导的淋巴细胞增生试验证实，雷公藤提取物雷公藤红素主要抑制T淋巴细胞的增生，其抑制作用是可逆的，并无明显的细胞毒作用。以小鼠移植物抗宿主反应为指标发现雷公藤碱C对细胞免疫也有一定抑制作用;大剂量雷公藤总甙可使动物胸腺萎缩，但不引起脾脏减轻。雷公藤总甙只能部分抑制局部同种移植物抗宿主反应，并只有立即给药才有此种抑制反应。研究认为雷公藤抑制细胞免疫作用与抑制胸腺有关。亦有认为是直接作用于T效应细胞或通过调节Ts/Th的比值而抑制细胞免疫反应;或直接抑制B 淋巴细胞产生抗体，通过抑制TH细胞间接抑制抗体，产生活化抑制细胞，或几种机制同时起作用。总之，雷公藤抑制免疫应答是经多种途径而实现的。
(2) 对体液免疫的影响 雷藤素甲的最大溶血稀释度 (1：32) 较对照组 (1：256) 低，小鼠体外溶血试验发现，雷公藤可使类风湿关节炎患者血清IgG、IgA、IgM明显下降，补体 C3显著增高，r-球蛋白明显下降。对体液免疫抑制作用，以溶血素反应为指标表明雷公藤碱 C对体液免疫也有抑制作用。雷公藤醋酸乙酯提取物、雷公藤总碱可明显降低小鼠血浆和脾脏 cGMP含量，提高cAMP/cGMP比值，这可能是雷公藤抑制机体免疫功能的机理。
7.对生殖系统的影响
雷公藤提取物对雄性和雌性动物的生殖器官和功能均有不同程度的影响，长期应用雷公藤总甙可致睾丸和附睾重量减轻，精子数量显著减少，且完全失活。血浆睾丸酮显著下降，曲细精管内精子细胞及精母细胞脱落、退化、消失，并累及部分精原细胞。总碱除有可逆性抗生育作用外，对睾丸生精细胞的抑制作用最明显，并且毒性小。雷公藤可使雌性大鼠动情周期不规则，减少排卵的数量和频率，使子宫重量减轻。雷公藤多甙对雌鼠生殖系统的影响比对雄鼠轻得多。雷公藤使育龄妇女月经减少甚至闭经，血清雌二醇水平下降，滤泡刺激素 (FSH) 及黄体激素 (LH)水平升高。雷公藤多甙导致闭经主要与卵巢功能的抑制有关。雷公藤对生殖系统的影响是可逆的，其抑制机理可能与雷公藤不是先择性地抑制更新组织有丝分裂作用有关。
8.对泌尿系统的影响
雷公藤提取物对肾病的主要效果是使蛋白尿减少或消失，即使效果不显著，用药后蛋白尿中的大分子成分也可消失，或使高分子蛋白尿转为中分子蛋白尿，这可能与降低肾小球滤过膜的通透性有关。在IgA肾病中，用雷公藤治疗后尿蛋白定量及红细胞明显减少，血浆蛋白明显升高，血清IgG及IgA有显著下降而肾功能无变化。实验表明，雷公藤可降低肾病鼠尿总蛋白及白蛋白的排除量，可能具有阻止与修复嘌呤霉素所致肾小球滤过膜蛋白之破坏作用。从而维持其阴电荷屏障的完整性，减少蛋白尿滤过。用雷公藤多甙对分析肾炎影响的实验研究显示，雷公藤多甙能显著降低大鼠异体相的肾组织学改变，但不能影响电子致密物肾小球基底膜沉积。其实验结果表明雷公藤多甙的这种保护机制可能是清除了氧自由基和/或抑制了脂质过氧化反应的结果。 1.雷公藤根醇提取物及雷公藤甲素或乙素50～400μg/kg对小鼠白血病L1210 有明显抗肿瘤活性，对小鼠L1210及P388的有效剂量为0.1mg/kg。雷公藤甲素0.25mg 及0.2mg/kg时对L615小鼠白血病有明显疗效，使生存期延长率分别达 159.8%及87.8%以上，并可使部分动物长期存活。对长期存活动物再移植L615白血病细胞，每月1次，连续3次，动物仍长期存活而不发病。雷公藤甲素，在持续接触下，对5个乳腺癌和胃癌细胞系中的4个能抑制其软琼脂集落形成70%以上，IC50为 0.504～1.22μg/L。雷公藤甲素对小鼠肉瘤S37、肝癌及大鼠W256实体型瘤亦有一定疗效，其瘤重抑制率分别为38%、46.7%及50%，但疗效不稳定。
2.雷公藤酮是细胞毒药物，对体外培养的人鼻咽癌KB细胞的ED50为0.0042μg/ml。雷公藤碱、雷公藤定碱对小鼠白血病L1210、P388有明显的抗肿瘤活性，并对人鼻咽癌有抑制作用。其抗肿瘤作用与分子中具环氧基及不饱和内酯环有关。雷公藤内酯对 L1210等癌细胞的体外杀伤作用与其抑制核酸合成有关。本品所含大环生物碱如南蛇藤肉桂酰胺碱也有抗白血病活性。
3.从雷公藤浸膏中分到的一种新组分25～45mg/kg腹腔注射间断给药2～3 次，能显著延长小鼠肝腹水癌(H22)、肉瘤S180、小鼠艾氏腹水癌(EAC)及乳癌荷瘤小鼠的生存期，延长率均大于100%，口服对小鼠S37瘤重抑制率达42%，对3-甲基胆蒽 (3-MCA)碘油溶液支气管内注入诱发的大鼠实验性肺癌，瘤重抑制率达65.13%，以 10μg/ml、20μg/ml浓度培养能杀死95%以上HL60细胞，20μg/ml、40μg/ml能杀死90%的恶性淋巴肉瘤细胞(Duadi)。雷公藤对子宫颈癌U14抑制率达40%左右。
图3为雷公藤中雷公藤甲素与雷公藤次碱的分离

图4为雷公藤茎叶中三萜类成分的研究 色谱条件
色谱柱：Hypersil C18柱(250mm×4.6mm，5μm);流动相：乙腈-水(40：60);流速：1.0ml/min;检测波长：210nm。
供试品的制备
将本品粗提品于105℃下烘干5h，研细。取约1.5g，精确称定，加乙醇10ml，超声10min，滤过。滤液浓缩后移至中性氧化铝柱，以石油醚-醋酸乙酯(8：2)淋洗，弃去淋洗液，再以石油醚-醋酸乙酯(1：4)洗脱，收集洗脱液，蒸干。残渣以氯仿溶解后定容至1ml。取氯仿溶液50μl，50℃下空气吹干，残渣用1ml流动相充分溶解。按本法色谱条件进行测定，结果见图5。

图5为雷公藤中雷公藤甲素的HPLC图
a对照品;b样品 性状鉴别
干燥的根圆柱形，直径0.5～3cm。外表面粗糙，土黄色或橙黄色，木栓层易脱落。皮部易剥离，可见呈环形或半环形横向断裂的缝隙。木质部黄色或黄白色，质地坚硬，难折断，折断时有粉尘飞扬，断面显纤维性，切断面观木栓层、韧皮部及木质部界限明显，木质部密布针眼状孔洞。气微，味苦。
显微鉴别
根横切面 木栓层为数十列木栓细胞，有的内含红棕色或黄棕色物。皮层狭窄或无。韧皮部有众多含棕色物细胞，射线略呈漏斗状，射线细胞切向延长，内含大量淀粉粒，并可见较大的草酸钙方晶。形成层环明显。木质部导管多单个径向排列，旁有纤维束分布。木射线宽一至多列细胞，细胞常含棕色物及草酸钙方晶，其旁为一至多列木纤维，有的纤维胞腔内亦见淀粉粒。
理化鉴别
取本品粉末适量，用乙醇回流提取，提取液回收溶剂，用氯仿溶解，制成样品液。以雷公藤甲素为对照品，吸附剂为硅胶G。展开剂为乙醚-氯仿(1：2)。展层后，用2%3，5-二硝基苯甲酸乙酸液与2mol/L氢氧化钠乙醇液(1：3)显色，样品液与对照品液在相应位置上有相同颜色的斑点。 雷公藤毒性因药材质量、药用部位、制剂、剂型、观察方法等不一致，结果有较大差别，口服给药对小鼠的LD50值大致如下：雷公藤全根低浓度醇提取物为26.55±0.02克/千克; 根皮煎剂为21.61克/千克; 根芯煎剂为28.65± 1.18克/千克; 全根醋酸乙酯提取物为169.0± 0.016毫克/千克;雷公藤总甙 (根芯) 为159.7± 14.30毫克/千克; 雷公藤总生物碱为504.0± 29.48毫克/千克; 雷公藤内酯醇为1.195±0.204 毫克/千克。
毒理：实验证实雷公藤对实验小鼠有致突变作用及诱发染色体畸变作用，对人染色体确有一定损伤作用，凡服药近2周就有引起染色体畸变的可能，认为有潜在的致癌危险性。长期服用无明显的蓄积毒性。由于雷公藤有很强烈的胃毒作用，口服后对胃粘膜产生直接刺激作用，可使胃粘膜充血、水肿，亦可抑制前列腺素的产生，使胃粘膜受前列腺素的保护作用减弱，而易致损伤。雷公藤致死者尸检可见胃肠粘膜出血及多发性浅表溃疡形成，雷公藤制剂对心肌有一定的损害作用，使心肌酶活性降低，进而导致循环衰竭，这是中毒早期(中毒后 1—2天)的主要死因。临床表现为心源性休克与心源性脑缺血综合征、心肌炎诱发急性肺水肿等。还可使肾脏近曲小管坏死，并发肾功能衰竭，这是中毒后病程迁延者的重要死因。雷公藤还可造成中毒性肝炎，选择性地损害淋巴细胞，大剂量时有抑制骨髓作用。此外，对睾丸亦有不同程度的损害 常规剂量服用本药副作用发生率约36.7%。超过常规剂量服用，尤其服用禁止入药部分，如嫩叶、芽尖等，或误服采食雷公藤花酿制的蜂蜜均可引起中毒。个别对雷公藤敏感的特异体质者，虽用常量亦可中毒，一般认为服雷公藤叶2—3片即可中毒，嫩芽7个(约12克)或根皮30—60克可致死。一般中毒后24小时左右死亡，最多不超过4天。
中毒表现：(1)消化系统：上消化道强烈烧灼感，腹部剧烈绞痛，阵发性加剧，剧烈呕吐，严重腹泻，便血，肝区疼痛，肝肿大，触痛，腹胀，黄疸，SGPT升高;(2)心血管系统：胸闷，心悸，气短，呼吸困难，发绀，脉捕细弱，心率快，心音低钝，可伴有心律不齐或心电图心肌受损改变。尚可出现肢冷，体温降低，血压下降。严重者可发生心源性休克，产生急性心源性脑缺血综合性而猝死; (3)泌尿系统： 腰痛，浮肿，少尿甚至尿闭，尿中出现红、白细胞，管型及蛋白，严重者可有肉眼血尿，血NPN、BUN增高; (4) 呼吸系统： 呼吸急促，紫绀，个别可发生肺水肿而出现呼吸衰竭和呼吸骤停而死亡; (5)神经系统： 头昏，乏力，烦燥或嗜睡，感觉过敏，口唇，舌及全身麻木等;(6)血液系统： 血便，血尿，口鼻出血，皮下出血。此外长期应用雷公藤尚可出现：育龄女性月经减少乃至闭经;男子精子数明显减少甚至完全消失;皮疹、皮肤瘙痒及色素沉着，此外尚有潜在的致癌危险。
救治：西医药：中毒后应及时催吐，洗胃，导泻，输液，利尿，以促使毒物迅速排出体外。出现中毒性心肌炎、心源性休克时可使用皮质激素、大剂量维生素C、能量合剂、极化液等营养心肌、增强代谢药物及强心药物。出现急性肾功能衰竭时，可用速尿，并按急性肾功能衰竭处理，尽早进行透析治疗。出现脑水肿、肺水肿时各按常规处理。出现中毒性肝炎时予保肝措施，有水、电解质、酸碱失衡，腹痛，出血等情况，可对症处理，并注意预防感染，给予支持疗法等。 性味 苦、辛，寒; 有大毒。
功能主治 清热解毒，祛风除湿，通经活络，消肿止痛，杀虫止痒。用于类风湿性关节炎，肾炎及多种皮肤病，虫蛇咬伤，肿瘤等。