无缝克隆

Pro Ligation-Free Cloning System（无连接酶克隆系统）是一款商业化无缝克隆试剂盒，用于在体外快速、高效地组装多个 DNA 片段，无需使用传统的限制性内切酶和 DNA 连接酶。

2X Pro Ligation-Free Cloning MasterMix：含所有必需酶和缓冲液；
阳性对照插入片段（Positive Control Insert）;
阳性对照载体（Positive Control Vector）。

Pro Ligation-Free Cloning System 基于同源重组原理，通过试剂盒中的外切酶、DNA 聚合酶与耐热连接酶协同作用，先将带有 15–25 bp 同源末端的载体与插入片段消化出互补单链突出端，使其退火配对，再由聚合酶填补缺口、连接酶封闭切口，在无传统 DNA 连接酶参与下一步完成环状重组质粒的构建。

Pro Ligation-Free Cloning System无缝克隆主要用于分子克隆中目的基因与载体的快速重组，可实现多 DNA 片段拼接、载体改造、定点突变及 CRISPR 等表达载体构建，广泛应用于基因功能研究、蛋白表达制备及合成生物学等场景。