H22细胞 (小鼠肝癌细胞) (STR鉴定正确)

H22细胞 (小鼠肝癌细胞)又称Hepatoma-22细胞系。H22来源于BALB/c小鼠肝细胞癌，通过皮下或原位接种BALB/c小鼠，建立同源移植小鼠模型。该细胞系广泛用于肿瘤生物学、免疫治疗和药物筛选研究。

H22细胞是分离自小鼠腹水，由大连医科学院建立。 小鼠 肝 悬浮生长 淋巴母细胞样

完全培养基：RPMI 1640 + 10%FBS + 1P/S
气相：95% 空气 + 5%
CO2温度：37℃

肝胆癌细胞

传代比例：1：2 ~ 1：4
传代方法：当细胞汇密度达到80%-90%，即可传代培养。悬浮细胞建议采用半换液传代，即将培养瓶站立静置5-10min，肉眼可见细胞沉底，吸取1/2~2/3上清至离心管离心，将瓶内剩余悬液按1:2或1:3的比例转移至新的培养瓶，将离心管中的细胞重悬后放入培养瓶添加新鲜完全培养基即可。

冻存液配制：完全培养基 + 10% DMSO 或 90% FBS + 10% DMSO
冻存方法：细胞按照传代步骤收集细胞至离心管并计数，根据计数的密度决定细胞冻存数量，一般推荐细胞冻存密度为1×106-1×107个活细胞/管。离心后弃上清，加入配制好的冻存液重悬，分配到冻存管中，每管1mL。将冻存管放入程序降温盒中进行梯度降温，然后放入-80℃冰箱降温，24h后将冻存管转入液氮罐中。若没有冻存盒，可于冰箱4℃放置30min，随后转移至-20℃冷冻2h，接下来将其放于-80℃超低温冰箱中过夜，最终放置于液氮中以长期保存。

1.取出1mL冻存管后，迅速放入37℃水浴锅中不断摇晃使其解冻，直至冻存管中无结晶（此过程尽量在2min内完成）；
2.准备15mL离心管，加入2-6mL完培，将冻存管中的细胞悬液移至离心管，1000 rpm离心3~5min；（比较难养的细胞可适量增加离心管中的完培）
3.吸弃上清，用新鲜培养基重悬细胞，接种至无菌的培养器皿中，轻晃动混匀后放入37℃、5%CO2细胞培养箱中培养。
注：复苏第二天若细胞状态较好，但漂浮碎片较多可做换液处理；复苏的细胞需要时间恢复状态，当复苏好后密度低于80%时，2天内暂时不要换液，细胞生长状态恢复后再进行后续传代等操作。

H22细胞 (小鼠肝癌细胞)STR鉴定位点及鉴定结果如下图所示：

肿瘤细胞