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小鼠溴脱氧核苷尿嘧啶(BRDU)ELISA试剂盒的应用
小鼠溴脱氧核苷尿嘧啶(BRDU)ELISA试剂盒是采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附(ELISA)的检测试剂盒。 将往预先包被小鼠溴脱氧核苷尿嘧啶(BRDU)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠游离前列腺特异性抗原(FPSA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算小鼠溴脱氧核苷尿嘧啶(BRDU)样品浓度。目前常用的细胞增殖标记物有4种,DNA聚合酶α(DNA polymeraseα),增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA),Ki-67和5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brdu)。其中Brdu为组织细胞非内源性表达存在,应用相对较广。Brdu,也称为溴化去氧尿苷,一种合成的胸苷类似物,在S期可替代胸腺嘧啶核苷选择性结合到细胞DNA中。从而检测细胞DNA合成和标记细胞分裂,凋亡等行为。在遗传研究中Brdu可通过活体注射或细胞培养加载,然后使用抗Brdu的单克隆抗体进行特异性标记,ICC或IHC法染色法显示增殖细胞。另外,还能同时结合其它细胞标记物,双重染色,来判断增殖细胞的种类,增殖速度等,对研究细胞动
2020-03-18
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