条件性基因敲除小鼠的操作原理
条件性基因敲除小鼠主要是通过染色体位点特异性重组酶系统来实现的,如Cre-LoxP系统、FLP-Frt系统和Dre-Rox系统等 ,其中最常用的是Cre-LoxP系统。这一系统是在待敲除的一段目的基因序列的两端各放置一个LoxP序列,得到Floxed ( Flanked by loxP)小鼠。该floxed小鼠在与表达Cre重组酶的小鼠杂交前,目的基因表达完全正常,从而能够避免全基因敲除可能出现的胚胎致死。而当该loxed小鼠与组织特异性表达Cre重组酶的小鼠杂交后,即可获得目的基因在特定的组织或细胞中被敲除的小鼠,而该基因在其它组织或细胞中表达正常。 floxed小鼠如果与不同的Cre重组酶小鼠杂交,可以使目的基因的敲除发生在小鼠的任一组织或细胞中。此外,如果与控制Cre重组酶表达的诱导系统相结合, 还可以使目的基因的敲除发生在小鼠发育的任一阶段,实现对目的基因表达的时空两方面调控。
2020-02-17
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