木兰花碱的制备及应用

概述^[1][2]

木兰花碱，又称木兰碱(magnoflorine)是其中的一个主要活性成分，为阿朴菲型生物碱，具有抗炎、抗微生物和细胞毒作用。

制备^[1-2]

方法一、木兰花碱的制备

步骤一、将黄连1kg干燥后粉碎，0.5％稀硫酸溶液提取，提取液用氧化钙中和，调节pH值5，浓缩至1.0g/mL。浓缩液加浓盐酸调节调节pH值3，再加入氯化钠，直至溶液中氯化钠的质量分数达到5％wt，放置24小时，离心过滤，移除黄连总生物碱，得到母液；

步骤二、依次用石油醚、二氯甲烷各萃取母液3次，每种溶剂与母液的体积比为1：0.5，将二氯甲烷萃取液合并后浓缩，得到粗浓缩物；

步骤三、柱层析：粗浓缩物硅胶拌样后，按质量比为1:3的粗浓缩物和硅胶装柱，用体积比为(1-10):1的二氯甲烷-甲醇混合溶剂进行梯度洗脱，合并含有木兰花碱组分的流份后进行浓缩，得到精浓缩物。精浓缩物硅胶拌样后，再将质量比为1:5的精浓缩物和硅胶装柱，用体积比为(20-1):1的二氯甲烷-甲醇混合溶剂进行梯度洗脱，合并含有木兰花碱组分的流份后进行浓缩，得到高纯度木兰花碱；其中，用薄层层析检测流份，薄层层析法检测流份的条件为：展开剂为体积比为2：1的二氯甲烷和甲醇，采用紫外灯下检测或碘化铋钾显色。

图1为抑制HaCaT细胞凋亡的实验结果图。

方法二、木兰花碱制备方法

(1)粗提物的制备：

酸枣仁250g粉碎，通过40目筛，以石油醚脱脂后，分别加1200ml、800ml、600ml百分 浓度为70％的乙醇水溶液，加热回流提取3次，每次1小时，滤过，合并提取液，滤液浓缩乙醇 至无醇味后用2倍量水溶解，用正丁醇萃取5次，提取液减压浓缩，回收溶剂后得到正丁醇粗 提物，即待分离样品，其HPLC图谱如图1所示。

(2)采用高速逆流色谱法分离木兰花碱和斯皮诺素、6″′-阿魏酰斯皮诺素：

取正丁醇、乙酸乙酯和水的体积比为2:3:5，置于分液漏斗中配制两相溶剂系统， 取上相为固定相，下相为流动相；将固定相充满逆流色谱的色谱柱，在25℃下，主机正转，转速为500r/min，然后以7ml/min的流速泵入流动相，至两相溶剂在柱中达到平衡状态；取步骤(1)制备的混合粗提物，用上相、下相体积比1:1的混合溶剂溶解后进样，以波长280nm的 紫外检测器检测流出液，根据高速逆流色谱图，见图2，对72min到84min、86min到100min和 176min到202.5min对应的流出液分别进行合并收集，浓缩、干燥至恒重。

应用^[3]

木兰花碱对于抑郁症、失眠疾病具有显著的改善和治疗作用。已有研究还证实，木兰花碱在保护心血管系统，调节免疫功能和抗氧化等方面具有良好的功效。因此木兰花碱的药用及保健价值研究，逐渐成为国内外研究的热门领域，

主要参考资料

[1] [中国发明] CN201811638606.2 以黄连提取母液为原料制备高纯度木兰花碱的方法、由其制备的高纯度木兰花碱及应用

[2] [中国发明] CN201810470007.8 木兰花碱制剂和制备方法及应用

[3] CN201810468387.1木兰花碱在制备防治失眠症抑郁症药物的用途和制备方法