牛胆粉的应用

背景及概述^[1][2]

牛胆粉为动物牛胆汁的干燥品，其传统制造工艺为取牛胆汁、滤过、干燥即得，为绿褐色或棕褐色的块状物或粉末，有的呈半透明角质样，尝之慢慢溶化，气微腥，味苦，易吸潮。牛胆粉味苦，性寒，用于医药中有清肝明目，利胆通便，解毒消肿之功能。

制备^[1]

CN201810723233.2提供一种牛胆粉的生产方法，其工艺步骤如下：

步：熬制：牛苦胆破皮过滤后，加入加热锅中熬制；

第二步：脱脂：在熬制过程中锅内温度达到20℃-30℃时开始缓缓依次加入双氧水，将出现的油脂浮沫舀出；

第三步：过滤：将上述脱脂后所得混合物放入离心机中过滤；

第四步：干燥：过滤后再放入加热锅中熬制，得牛胆干品；

第五步：粉碎：根据需要将牛胆干品粉碎为不同目数的粉末颗粒。

本发明的有益效果：

1、本发明在第二步熬制过程中，当锅内温度达到20℃-30℃时加入双氧水，将出现的油脂浮沫舀出，即脱去了牛胆中存在的油脂，使制得的牛胆粉含量更高，更为纯正。

2、本发明在第二步熬制过程中，当锅内温度达到20℃-30℃时加入双氧水时，不是一次性加入全部的双氧水，而是缓缓并分若干次加入锅中，这样能够使双氧水达到充分反应，从而脱脂率更高。

3、本发明采用离心机过滤，使牛胆过滤更彻底。

应用^[2-3]

一、一种牛胆粉中提取纯化含有鹅去氧 胆酸、熊去氧胆酸、猪去氧胆酸的总提取物的方法。鹅去氧胆酸在临床上不仅用溶解胆固醇类结石和纠正饱和胆汁的药物，还具有显著地平喘、抗炎、镇咳和祛痰等作用。鹅去氧胆酸也是昂贵的熊去氧胆酸的合成原料，它们都是治疗胆道疾病的有效药物。

熊去氧胆酸具有细胞膜稳定作用，对肝脏毒性物质具有解毒作 用，同时增加肝低密度脂蛋白的摄取，从而增加肝细胞脂质的输出，同时增加脂肪酸氧化或甘油三脂转化，缓解肝细胞脂肪变性。猪去氧胆酸具有降血脂、镇痉、祛痰等作用，为人工牛磺的重要 成分，临床上可用于治疗高血脂症、气管炎以及由肝胆疾病引起的消 化不良，对百日咳菌、白喉杆菌、金黄色葡萄球菌亦有抑制作用。

特别地，所述从牛胆粉中提取纯化含有鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸、 猪去氧胆酸的总提取物的方法是利用大孔树脂有效提取、有效除渣、 有效富集、有效纯化的工作原理；利用物美价廉的不用浓度的乙醇达 到最后总提取物的纯化；提纯之后的总提取物可以进行蒙药制剂剂型 的改革研究，具体步骤包括：

(1)牛胆粉95％乙醇超声提取(超声频率50-80Hz)：取一定量 牛胆粉加入一定体积95％乙醇(物料比例1∶2)超声提取3次，每次 1h，每一次超声提取结束后，提取液上加适量乙酸乙酯放置30min沉 淀，等完全沉淀后用布氏漏斗过滤，沉淀再加95％乙醇继续第二次提 取，以上方法提取三次。最后合并过滤液。

(2)回收浓缩：回收浓缩滤液，浓缩至没有乙醇味。

(3)冷冻干燥：浓缩液冷冻干燥，得牛胆粉冻干粉。

(4)牛胆粉冻干粉40％乙醇超声(超声频率50-80Hz)溶解，备 用。

(5)大孔吸附树脂分离纯化：称取1kg处理树脂于玻璃层析柱 中，缓慢加入上述溶解液，依次用20％、40％、60％、80％乙醇洗脱， 过滤，收集60％和80％乙醇洗脱液，浓缩60％和80％乙醇洗脱液，冷冻 干燥60％和80％乙醇浓缩液。

二、CN201110148921.9公开了一种临床血液样品病原菌DNA的制备方法和试剂盒。它是将临床血液样品与牛胆汁或牛胆粉混合，使牛胆汁或牛胆粉裂解非病原菌细胞；在裂解非病原菌细胞的同时或裂解后，加入脱氧核糖核酸酶降解非病原菌细胞裂解后释放出的DNA；将上一步骤获得的混合物离心，收集沉淀物；按常规方法从沉淀物中制备病原菌DNA。

本发明利用临床样品中的致病细菌和真菌对牛胆汁和牛胆粉具有耐受性的特点，利用牛胆汁或牛胆粉将临床血液样品中的非病原菌细胞裂解，使非病原菌细胞DNA释放出来，再用脱氧核糖核酸酶降解，选择性去除非病原菌DNA，使病原菌DNA富集。利用该DNA进行PCR反应，能避免占绝大多数的非病原菌DNA对病原菌PCR检测的干扰，提高PCR反应的专一性和灵敏度。

主要参考资料

[1] [中国发明] CN201810723233.2 牛胆粉的生产方法

[2] [中国发明] CN201510845226.6 一种从牛胆粉中提取纯化含有鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸、猪去氧胆酸的总提取物方法

[3] CN201110148921.9一种临床血液样品中病原菌DNA的制备方法和试剂盒