达玛(树脂)胶的主要应用

背景及概述^[1]

人参皂苷是人参的主要活性成分，人参皂苷的生物合成是从乙酰辅酶A经过甲羟戊酸途径，到2，3-氧化鲨烯再环化形成达玛烯二醇-II(Dammarenediol-II)；达玛烯二醇经羟基化生成人参皂苷苷元，再经糖基化修饰完成。离体细胞培养辅以代谢调控是人参皂苷生产的一种途径。人参细胞培养已进行了多年，在细胞培养过程中研究物理、化学以及生物等因素对人参皂苷代谢的影响有过很多报道，但还未见达玛树脂提取物对人参细胞中人参皂苷合成影响的报道。达玛树脂是东南亚一带的龙脑香科(Dipterocarpaceae)坡垒属(hopea)、棒果香属(Balanocarpus)、娑罗双(Shorea)和瓦特香属(Vateria)等植物及橄榄科橄榄属植物的分泌物，外观呈透明淡黄至琥珀色固体，含羧酸、醛类和糖类、三萜类化合物。有报道指出达玛树脂中的三萜类化合物有人参皂苷生物合成前体物达玛烯二醇-II及其类似物。

应用^[1]

达玛树脂提取物对人参细胞中皂苷单体含量的影响。达玛树脂提取物对细胞中人参皂苷积累的影响可以看出玛树脂提取物提高人参培养细胞中3种皂苷单体含量的作用。在培养到第20天时，每50mL培养基中添加1.2mg提取物的人参细胞中的人参皂苷Rb1、Rg1和Re的含量，比未加提取物的分别提高了42.3%±2.6%、33.2%±1.4%和35.6%±1.6%。相反，添加玛树脂提取物II对人参皂苷在培养细胞中的积累有抑制作用，其中对原人参三醇型人参皂苷单体Rg1、Re积累的抑制作用较大。在培养的第20天时，每50mL添加1.2mg提取物的细胞中Rg1、Re含量比未加的约低20%。

制备^[1-2]

方法1：达玛(树脂)胶制备如下：取一块达玛树脂块放入研钵中，用研棒压碎成小块，再研磨成细粉；取50.0g达玛树脂粉末，放入500mL烧杯中，再加入60.0g硅胶，用玻璃棒轻轻搅拌达玛树脂和硅胶混合物3min，使其充分混匀；向烧杯中加入200mL石油醚，用玻璃棒沿逆时针方向搅拌，搅拌5min，使硅胶、达玛树脂和石油醚混匀后上样。以500g硅胶柱层析，丙酮—石油醚不连续梯度洗脱。石油醚与丙酮比例依次为9：1、8：2、7：3、6：4、5：5、4：6、3：7、2：8、1：9，每种洗脱液用量为250mL，每250mL为一流分，共收集9个流份。进行薄层层析(TLC)检查(普通硅胶板，展开剂：石油醚与丙酮的体积比是4：1，显色剂为5%的硫酸乙醇溶液)。合并结果近似部分，密封静止放置14d。过滤收集出现的沉淀，称重，用氯仿溶解，进行TLC检测(展开剂氯仿：甲醇9：1)，再次硅胶柱层析，用2%甲醇一氯仿洗脱，20mL为1流份，进行TLC检查(展开剂石油醚：丙酮=4：1)。合并结果近似部分，挥干洗脱液，称重，用二甲亚砜溶解备用。

方法2：一种水性达玛树脂，其合成步骤为：S101：将100g达玛树脂和200g醋酸乙酯溶剂搅拌至完全溶解后过滤除渣，并在真空中干燥，制得精制达玛树脂待用；S102：将50g精制达玛树脂和100g醋酸仲丁酯溶剂加入500ml的烧瓶中，并通过搅拌、抽空并用氮气冲洗三次的方法将烧瓶中空气除去；S103：用注射器经橡胶密封盖加入0.1304g四氧化锇的醇溶液后，在油浴中加热至50℃，并保温反应3.5小时后冷却，分离。

主要参考资料

[1]达玛树脂提取物对人参细胞中皂苷单体含量的影响

[2]CN201610114975.6一种水性达玛树脂及其制备方法、应用