神经节肽(抗原)的制备方法

背景及概述^[1]

神经节一般是指位于脑和脊髓以外的神经元细胞体集团所在的节状构造，例如交感神节和副交感神经节，多数交感神经节主要集中在脊柱两旁的交感神经链中，多数副交感神经节分散在效应器附近，有的位于效应器组织中，这两种神经节的化学递质都是乙酰胆碱，它们的受体都属于烟碱型，交感和副交感神经节的功能都能受神经节阻断药的影响，例如使用六羟季胺和美加明后除出现交感神经功能障碍外，往往还有副交感神经功能障碍。神经节肽(抗原)是由29个氨基酸残基组成的神经肽。最初认为只在相当小的背根神经节细胞群体及脊髓神经元中出现，后发现在消化道及胰腺中也广泛分布。与感觉的调整有关，对痛觉传递及脊髓兴奋起抑制作用。是中枢神经系统及内分泌胰腺的神经调节肽。

制备^[2]

神经节肽(抗原)的制备如下：通过使用Labortec AG型SP 650肽合成仪和9-芴基甲氧基羰基（Fmoc）固相肽合成来合成神经节肽(抗原)。使用用于肽酰胺的TentaGel S RAM树脂（容量0.25mmol / g）作为起始材料，使用O-（苯并三唑-1-基）-1,1,3,3-四甲基脲四氟硼酸盐并加入N-羟基苯并三唑（1：1）偶联方法，将所有氨基酸作为活性衍生物偶联，用N，N-二甲基甲酰胺中的20％哌啶进行Fmoc基团的脱保护，合成完成后，用三氟乙酸/苯酚/三异丙基硅烷/水（88：5：2：5v / v / v / v）混合物从树脂上切下肽，由此获得的粗制肽通过反相高效液相色谱法（RP-HPLC）在制备型Vydac C-18柱（32×240mm，15-20μm粒度）上纯化，具有几个等度系统和乙腈（ACN）的线性梯度。在0.1％三氟乙酸（TFA）中。将洗脱液分级并通过分析型RP-HPLC分析，肽的纯度（大于98％）。通过具有Vydac C-18柱（4.6×250mm，5μm粒径）的分析型Beckman“System Gold”色谱仪检查，其具有几种等度系统和0.1％TFA中ACN的线性梯度。通过氨基酸分析和电喷雾电离质谱（ESI-MS）确认肽的同一性。

主要参考资料

[1] 现代药学名词手册

[2] SYNTHESIS AND BIOLOGICAL PROPERTIES OF NEW CHIMERIC GALANIN ANALOGUE GAL(1-13)-[Ala10,11 ]ET-1(6-21)-NH2