石松灵碱的提取方法

背景及概述^[1]

石松灵碱是蛇足石杉提取物中的一种成分。蛇足石杉又名千层塔、 蛇足草，作为药用植物，我国唐代陈藏器著的《本草拾遗》、清代吴其浚著的《植物名实图考》中就有记载，中国民间将其用于治疗跌打损伤、毒蛇咬伤和烧烫伤。

提取方法^[1]

CN200410084633.1提供了一种含有石杉碱甲和石杉碱乙复合成分的蛇足石 杉提取物，该提取物含总生物碱以重量％表示为30％～99％(w/w)。在该总生物碱中，包括石杉碱甲(Huperzine A)和石杉碱乙 (Huperzine B)，还包括石杉碱丙(Huperzine C)，石杉碱丁(Huperzine D)，石杉碱戊(Huperzine E)，石杉碱己(Huperzine F)，石杉碱庚 (Huperzine G)、6-β-羟基石杉碱甲(6-β-hydroxyhuperzine A)，蛇足石衫碱(Huperzinine)，石松灵碱(Lycodoline)，石松宁碱 (Lycodavine)，山芝宁碱(Serratinine)，山芝亭碱(Serratine)，8- 去氧山芝宁碱(8-Deoxyserratinine)，马尾杉碱N(Phlegmariurine N) 成分中的一种或多种，其中石杉碱甲和石杉碱乙的总含量以重量％表示为 75％～99％。

该方法包括下列步骤：

(1)提取：将生药蛇足石杉粉碎后置于提取罐中，用10～20倍 量含0.5～1.5％盐酸或酒石酸水溶液，20～50℃条件下，动态搅拌提取 24～48小时，得生药提取液；残渣用20～95％乙醇或水，80～100℃条 件下，回流提取1～3小时，得残渣提取液；；

(2)浓缩：将步骤(1)生药提取液和残渣提取液分别浓缩至不 超过原体积重量10～15％；

(3)萃取：将步骤(2)生药提取浓缩液用稀碱氨水调节PH值 至8～10，用氯仿反复萃取3～6次，合并氯仿萃取液，浓缩回收氯仿， 浓缩至不超过原体积重量10％；

(4)酸萃取：用1％～4％的柠檬酸或盐酸水溶液反复萃取上述步 骤(3)溶液1～3次；

(5)活性炭脱色：取步骤(4)酸水萃取液，用水稀释10倍， 活性炭用量为稀释后体积的1％～2％，搅拌10～30分钟，过滤得到透 明液体；

(6)浓缩：将上步骤(5)溶液浓缩至不超过原体积的10％；

(7)柱层析：将步骤(6)浓缩物上硅胶柱或大孔树脂或阳离子 交换树脂或聚酰胺树脂，采用洗脱用水或C1～C3的烷醇或丙酮或氯 仿或甲基或乙基酯或它们任意比例的混合溶液洗脱液进行梯度洗脱，搜集高含量流份；

(8)将步骤(2)残渣提取浓缩液加2～4倍量去离子水稀释，搅拌均匀，沉降6小时，上清液16000r/min高速离心，离心液上大孔树脂或阳离子交换树脂或聚酰胺树脂，采用洗脱用水或C1～C3的烷醇或它们任意比例的混合溶液进行梯度洗脱，搜集高含量流份；

(9)将上述(7)(8)溜份合并浓缩至原体积的10～20％，将浓缩液送至真空冷冻机中冷冻干燥或喷雾干燥或真空干燥，得蛇足石杉提取物。

主要参考资料

[1] CN200410084633.1 石杉碱甲、乙复合成分的蛇足石杉提取物及其制备方法