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小鼠神经元细胞试剂盒的应用

发布日期:2020/10/18 17:56:53

背景[1-7]

小鼠神经元细胞试剂盒适用于分离培养小鼠神经元细胞。利用小鼠神经元细胞试剂盒中提供的神经元组织分离体系来分离,EDTA/EGTA处理过的神经元组织能使得神经元组织细胞的一些功能特性发生改变,从而将神经元细胞分离开来。

小鼠神经元细胞试剂盒适用于分离培养小鼠神经元细胞。体系提供了佳的组织分离条件,分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外,体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系,可以大程度地降低所培养的神经元原代细胞中成纤维细胞的含量。

小鼠神经元细胞培养试剂盒适合于培养小鼠的神经元细胞。试剂盒包含:(1)OptiTDSTM小鼠神经元细胞组织解离液(2)小鼠神经元细胞组织处理缓冲液(3)FibrOutTM小鼠神经元细胞成纤维抑制剂(4)小鼠神经组织洗液(5)小鼠神经元细胞生长因子(6)小鼠神经元细胞基础培养基(7)小鼠神经元组织预备液。

神经元,又称神经组织,是构成神经系统结构和功能的基本单位。神经元是具有长突起的细胞,它由细胞体和细胞突起构成。其中,鼠神经元细胞是构成神经系统结构和功能的基本单位。细胞体位于脑、脊髓和神经节中,细胞突起可延伸至全身各器官和组织中。神经元的主要功能是接受、整合和传递信息,具有兴奋性、传导性和可塑性。小鼠神经元细胞传10代仍可以保持原代细胞的分化状态,进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。

应用[8][9]

小鼠神经元细胞试剂盒可用于小鼠耳蜗螺旋神经节神经元GABA_A、nACh和NMDA受体表达变化和老年性耳聋机制的研究:

老年性听功能障碍是中枢听觉系统和外周听觉系统共同退化的结果,中枢神经系统功能下降通常是由神经元功能退化引起,在耳蜗中,螺旋神经节神经元(SGN)是听觉传导通路的级神经元,是耳蜗毛细胞和听觉中枢之间的重要枢纽,因此螺旋神经节神经元发生年龄相关性退化是老年性耳聋外周神经系统发生发展的主要原因。

感音神经性老年性聋是以耳蜗毛细胞及螺旋神经节神经元渐行性退化为特征,但不伴有血管纹和其他耳蜗附属器的明显改变的以高频听力损害为主的耳聋,是老年性耳聋中最常见的一种类型。谷氨酸(Glutamate)是听觉传入神经系统重要的兴奋性神经递质,在耳蜗内介导神经细胞的兴奋传递,维持听觉系统的正常生理功能,NMDA受体是谷氨酸离子型受体之一,当内毛细胞接收声信号刺激兴奋后释放出神经递质到突触,并与突触后膜上的NMDA受体结合,产生产生兴奋性突触后电位(EPSP)将声信号传入听中枢。但是当谷氨酸释放过量,过度激活NMDA受体的时候会产生神经细胞兴奋毒性作用,导致细胞死亡。

γ-氨基丁酸(Gamma-aminobutyric acid,GABA)和N型乙酰胆碱(Nicotinic acetylcholine,nACh)是听觉传出神经系统的抑制性神经递质,保护耳蜗受外界强声刺激损伤,GABAA受体和nACh受体是听觉系统中重要的保护性受体。抑制性神经递质和兴奋性神经递质之间的平衡是维持听觉系统正常生理功能的关键。

因此,为了更好的了解老年性耳聋在听觉外周神经系统耳蜗内的发生机制,本实验采用与人类听觉系统形态学和生理学上相似的CBA/CaJ小鼠,检测并探讨老年性耳聋听力生理学特点,并运用半定量RT-PCR和免疫组织化学技术检测其耳蜗螺旋神经节神经元细胞GABAA受体,nACh受体和NMDA受体的mRNA和蛋白质在老年性耳聋中的表达情况,观察老年性耳聋小鼠的耳蜗形态学的改变并讨论其意义。

参考文献

[1]GRM7 variants associated with age-related hearing loss based on auditory perception[J].Dina L.Newman,Laurel M.Fisher,Jeffrey Ohmen,Robert Parody,Chin-To Fong,Susan T.Frisina,Frances Mapes,David A.Eddins,D.Robert Frisina,Robert D.Frisina,Rick A.Friedman.Hearing Research.2012(1-2)

[2]Downregulation of N-methyl-d-aspartate receptorζ1 subunit(GluN1)gene in inferior colliculus with aging[J].Yasunori Osumi,Seiji Bruce Shibata,Seiji Kanda,Masao Yagi,Hisashi Ooka,Takashi Shimano,Mikiya Asako,Kohei Kawamoto,Hiromichi Kuriyama,Toshiya Inoue,Toshimasa Nishiyama,Toshio Yamashita,Koichi Tomoda.Brain Research.2012

[3]Anti-epileptic drugs delay age-related loss of spiral ganglion neurons via T-type calcium channel[J].Debin Lei,Xia Gao,Philip Perez,Kevin K.Ohlemiller,Chien-Chang Chen,Kevin P.Campbell,Aizhen Yang Hood,Jianxin Bao.Hearing Research.2011(1)

[4]Age-related neuronal loss in the cochlea is not delayed by synaptic modulation[J].David Jin,Kevin K.Ohlemiller,Debin Lei,Elizabeth Dong,Lorna Role,David K.Ryugo,Jianxin Bao.Neurobiology of Aging.2011(12)

[5]Separate and combined effects of Sod1 and Cdh23 mutations on age-related hearing loss and cochlear pathology in C57BL/6J mice[J].Kenneth R.Johnson,Heping Yu,Dalian Ding,Haiyan Jiang,Leona H.Gagnon,Richard J.Salvi.Hearing Research.2010(1)

[6]Age-related hearing loss:Is it a preventable condition?[J].Eric C.Bielefeld,Chiemi Tanaka,Guang-di Chen,Donald Henderson.Hearing Research.2009(1)

[7]Processing of broadband stimuli across A1 layers in young and aged rats[J].Larry F.Hughes,Jeremy G.Turner,Jennifer L.Parrish,Donald M.Caspary.Hearing Research.2009(1)

[8]Over-expression of X-linked inhibitor of apoptosis protein slows presbycusis in C57BL/6J mice[J].Jian Wang,Trevor Menchenton,Shankai Yin,Zhiping Yu,Manohar Bance,David P.Morris,Craig S.Moore,Robert G.Korneluk,George S.Robertson.Neurobiology of Aging.2008(7)

[9]唐小兰.小鼠耳蜗螺旋神经节神经元GABA_A、nACh和NMDA受体表达变化和老年性耳聋机制的研究[D].广西医科大学,2013.

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