抑制剂SEL120-34A HCl的相关研究

SEL120-34A HCl全称：7,8‑二溴‑9‑甲基‑2‑(哌嗪‑1‑基)‑5,6‑二氢‑4H‑咪唑并[4,5,1‑ij]喹啉盐酸盐，是选择性ATP竞争性CDK8/CDK19抑制剂，多用于AML等肿瘤模型，研究STAT相关致癌转录通路，仅作实验室试剂，不可用于人体。

迪亚蒙-布莱克范二氏贫血(Diamond-Blackfan Anemia,DBA)可被视为核糖体病模型适应症。它是由核糖体蛋白质基因中的单等位基因失活突变引起的,导致核糖体生物合成受到妨碍。DBA是一种纯红细胞再生障碍,其特征在于红细胞生成素应答红细胞前体的数量严重减少。DBA患者目前以输血或皮质类固醇治疗,这些疗法与严重不良反应和治疗相关的死亡相关。本文中详细介绍了SEL120-34A HCl(DBA10)在该病症中的相关研究。

相关研究

1、SEL120-34A HCl拯救RPS19缺陷型小鼠的贫血

为了确定CDK8/CDK19抑制剂是否将拯救RPS19缺陷型小鼠中的贫血(Jaako etal.Blood.2011 Dec 1;118(23):6087-96),评价了DBA-9的体内作用。在多西环素诱导后36小时,对RPS19缺陷型小鼠每12小时给予10mg/kgDBA-9的口服剂量。5次剂量后停止治疗。最后一次治疗后48小时,分析外周血用于网织红细胞计数,这反映了正在进行的红细胞生成。在未经处理和经媒介物处理的Rps19缺陷型小鼠中网织红细胞计数严重降低,但在用DBA-9处理的RPS19缺陷型小鼠中得到拯救。

为了确定SEL120-34A HCl(DBA-10)和其他选择性CDK8/CDK19抑制剂拯救RPS19缺陷型小鼠中贫血的能力,根据本实施例中上述实验设置进行另外的体内实验。每12小时对RPS19缺陷型小鼠给予10mg/kgDBA-1、DBA-2、DBA-3、DBA-4、DBA-5、DBA-6、DBA-7、DBA-8、SEL120-34A HCl(DBA-10)、DBA-11或DBA-12的口服剂量。5次剂量后停止治疗。最后一次治疗后48小时,分析外周血用于网织红细胞计数,这反映了正在进行的红细胞生成。在用选择性CDK8/CDK19抑制剂处理的RPS19缺陷型小鼠中,网织红细胞计数得到拯救。除了拯救网织红细胞和血红蛋白水平之外,还确定了所测试的CDK8/CDK19抑制剂的其他作用,特别是它们拯救骨髓细胞减少、促进造血干细胞和祖细胞发育以及细胞周期停滞和细胞凋亡的能力。

2、SEL120-34A HCl(DBA-10)拯救原代DBA患者细胞的红细胞增殖和成熟

为了证实CDK8/CDK19抑制剂也在人DBA患者细胞中拯救红细胞生成,从健康供体和DBA患者中分离CD34+细胞。在支持红细胞祖细胞和前体扩增的条件培养CD34+细胞。将三种CDK8/CDK19抑制剂和媒介物对照添加到培养物中。与健康供体细胞相比,DBA患者细胞扩增很差,但在CDK8/CDK19抑制剂DBA-9和SEL120-34A HCl(DBA-10)存在下获得了增殖能力。与健康细胞相比,DBA患者细胞未能成熟为CD71+红细胞祖细胞和CD71/CD235a双阳性红细胞前体。在CDK8/CDK19抑制剂DBA-9和DBA10存在下,DBA患者细胞获得了成熟为红系祖细胞/前体的能力。这些结果表明CDK8/CDK19抑制剂也在人DBA患者细胞中拯救红细胞生成。

3、SEL120-34A HCl(DBA-10)是骨合成代谢剂

已知DBA-1、DBA-6和DBA-7具有作为骨合成代谢剂的作用。然而,作用机制并不清楚。本发明人首次证明DBA-7是选择性CDK8/CDK19抑制剂,并提出所有选择性CDK8/CDK19抑制剂诸如DBA-9和SEL120-34A HCl(DBA-10)也具有骨合成代谢特性。本发明人如下评价DBA-9、SEL120-34A HCl(DBA-10)和其他CDK8/CDK19抑制剂对骨形成的骨合成代谢作用。利用ST2细胞的碱性磷酸酶活性作为成骨细胞分化的指标，并且预期CDK8/CDK19抑制剂增强与DBA-7类似的活性(Saito etal.Bioorg.Med.Chem.2013,21,1628-42)。为了证实对原代细胞的活性,确定了CDK8/CDK19抑制剂对原代成骨细胞和破骨细胞的分化的作用。接下来确定了CDK8/CDK19抑制剂对体内成骨细胞分化和骨重塑的作用。实验包括评价啮齿动物模型中骨质疏松对面积骨矿物质密度的作用(Saito et al.Bioorg.Med.Chem.2013,21,1628-42)[1]。

参考文献

[1] LU许可公司. 用于治疗增殖减少性病症的化合物:CN201680063630.0[P]. 2018-07-31.