甘氨鹅脱氧胆酸钠的检测方法及条件

简介

甘氨鹅脱氧胆酸钠(Glycochenodeoxycholate,GCDC)作为一种结合型胆汁酸，其水平能直接反映出肝损伤程度。高效液相色谱法证实，通过给小鼠补充甘氨鹅脱氧胆酸钠可使其胆汁盐池人源化，此类小鼠慢性干细胞胆汁淤积单独诱导肝纤维化，继发肝损伤。另有学者研究表明，GCDC处理组明显增加肝脏干细胞凋亡率。在临床上测定血清中GCDC含量具有一定临床的意义。

甘氨鹅脱氧胆酸钠的性状

检测方法

质谱技术以其高灵敏度，高分辨率的检测优势在生命科学领域的应用越来越广泛，为质谱的发展注入了新的活力，形成了独特的生物质谱技术。此种方法需要对血清样本进行去蛋白前处理，检测步骤较多，且检测仪器昂贵。生化法检测过程简单，是目前临床化学检验的主流方法。由于国家尚未发布甘氨鹅脱氧胆酸测定试剂盒配套的标准物质，在日常检测过程中，缺少准确度对照用标准物质。本研究通过以高效串联质谱法和自主研发的生化试剂配套日立 7600 全自动生化分析仪，同时检测血清中甘氨鹅脱氧胆酸钠含量，并对检测结果进行统计和偏倚分析，考察两种方法检测结果的一致性，为临床生化检测的准确性提供理论依据。试验结果表明两种方法相关性较高，同时本试验也表明，两种方法存在一定偏倚，尤其是在血清甘氨鹅脱氧胆酸钠较低时，两种方法的检测结果偏差较大。因此，建议各临床实验室应根据本实验室的情况选择实验方法，并建立相应的实验室参考值，结合临床症状，保证实验结果的准确性，给出科学判断和解释。

检测条件

采用乙腈沉淀蛋白法处理血清：取50 μL血清于1.5 mL离心管中，加入100 μL80% 乙腈溶液，漩涡振荡30 s，室温静置20 min，10,000 g高速离心20 min，吸取上清液，再次高速离心20 min，吸取上清液，30℃氮气吹干，残渣用50 μL 甲醇溶解，混匀，高速离心20 min，吸取上清液进样分析。

PhenomenexC18色谱柱(150 mm×2.1 mm, 3 μm)；流动相: 0.1% 甲酸水溶液-乙腈 (50:50)；洗脱方式：等度洗脱；洗脱时间: 10 min；柱温：30℃；流速: 1.0 mL/min；进样量: 2 μL。

多反应检测扫描MRM模式；ESI电离源；正离子模式；毛细管电压: 4000 V；干燥气温度: 300℃；干燥气流速: 11 L/min；雾化器压力: 15 Psi；Precursor Ion: 432.2；Product Ion: 414.3(定量离子)、339.3；Fragmentor: 135；Collision Energy: 10；Cell Accelerator Voltage: 7。

参考文献

[1] 王煌煌,王素玉,王丽,等. 两种不同方法检测血清中甘氨鹅脱氧胆酸钠的对比分析 [J]. 中国标准化, 2023, (12): 250-252.