PureLink RNA小量试剂盒的应用

背景^[1-7]

PureLink RNA小量试剂盒提供了一种简单、可靠且快速的柱式方法，适用于各种来源的高质量总RNA提取，且无需使用诸如酚等危险试剂。从动物和植物细胞、组织及血液、细菌、酵母和液体样本中获取高产量、高度完整的RNA。PureLink RNA小量试剂盒包括了足够完成50次RNA纯化的RNA裂解液、离心柱、洗脱管、回收管、洗脱缓冲液和无RNA酶的水。

PureLink RNA小量试剂盒可从多种细胞和组织类型中快速进行总RNA纯化，一次提取可获得至多1000µg的纯化RNA。从少量到中量的起始材料可获得高质量的总RNA，且无基因组DNA污染。

PureLink RNA小量试剂盒结合了异硫氰酸胍裂解的无毒性以及硅胶膜纯化技术的快速、纯度高、易于使用的优点。这种安全、简便的流程可在不到20分钟的时间内完成，且无需使用危险的酚/氯仿抽提、CsCl离心、LiCl或乙醇沉淀。PureLink RNA小量试剂盒可高效分离高质量的总RNA，同时去除大部分基因组DNA。通常，需要来自动物组织或哺乳动物细胞系的RNA的大多数应用不需要额外的DNA酶处理。然而，一些应用，例如通过qRT-PCR进行基因表达分析而没有内含子跨越引物或使用来自具有非常小或没有内含子的生物体的样品可能需要更完全去除残留的污染DNA。

应用^[8][9]

PureLink RNA小量试剂盒可用于人同源盒基因NKX3.1表达调控的研究：

前列腺癌是男性肿瘤疾病中发病率最高的恶性肿瘤之一,在发达国家中其死亡率高居第二位,在我国其发病率也有逐年增高的趋势。前列腺癌的发生,发展和转移与NKX3.1密切相关。NKX3.1是前列腺特异表达的、受雄激素调节的同源盒基因,在前列腺胚胎发育、上皮分化及肿瘤发生发展中起重要作用。在胚胎形成过程中,NKX3.1的表达可作为前列腺上皮分化的重要标志。

NKX3.1基因敲除的老鼠显示前列腺上皮发育不良、腺管形态异常和蛋白分泌障碍,表明NKX3.1对于前列腺的正常发育及维持前列腺上皮的正常分化是必需的。而且NKX3.1基因敲除鼠随着年龄的增长,出现了类似于人前列腺上皮内瘤的病理变化,表明NKX3.1缺失可能与前列腺癌的起始有关。人同源盒基因NKX3.1位于染色体8p21,包括两个外显子,一个内含子,较短的5′-非翻译区和较长的3′-非翻译区。

约80%的前列腺肿瘤中存在该区域的杂合缺失,表明NKX3.1在前列腺癌中可能作为抑癌基因发挥作用。但也有研究显示不同的结果,有研究表明在前列腺癌标本中存在NKX3.1过表达情况,同时比较转移灶与原发灶的NKX3.1的表达情况,发现转移灶中NKX3.1过表达明显高于原发灶,说明NKX3.1过表达可能与前列腺癌的侵袭性有关。

参考文献

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