右旋异紫堇定的主要应用

背景及概述^[1]

异紫堇定碱别名异紫堇定、右旋异紫堇定、异可利定，属于阿朴啡类生物碱。阿朴啡生物碱是自然界中广泛分布并具有重要生物活性的一大类生物碱，广泛存在于木兰科、防己科、大戟科、马钱科、马究铃科、小檗科、番粟科、毛茛科、芸香科等植物中，目前从自然界分离得到的阿朴啡类生物碱已达四百多种。阿朴啡类生物碱具有广泛的药理活性，如抗血小板聚集活性（普遍，受体阻断活性（南天竹碱、南天竹宁）受体阻断活性（南天竹碱、紫堇块蓋碱、木兰花碱），弓离子通道阻滞活性（波尔定碱、海藥粟碱、樟苍碱抗氧化活性（紫堇球碱丨中枢抑制活性（紫堇球碱、紫堇块蓋碱、荷叶碱等。右旋异紫堇定为无色晶体。熔点185℃，[α]_D²⁰+195°(氯仿)。溶于甲醇、氯仿、丙酮，微溶于乙醚，不溶于石油醚。其甲醇溶液遇三氯化铁试液显绿色。用作镇痛剂。异紫堇定是一种天然化合物，具有镇静、催眠、止咳等活性。中药白药子为防已科植物金线吊乌龟StephaniacepharanthaHayata的干燥块根。具有清热解毒，凉血止血，散瘀消肿等功效，其中含有丰富的异紫堇定。现有技术中，异紫堇定的提取分离法主要采用有机溶剂法等，但这些提取工艺得到的异紫堇定的含量低，生产过程中污染严重，且不利大生产操作。

应用^[2-3]

右旋异紫堇定具有解疫、舒张血管、抗疾和抗心律不齐等多种药理作用。早在世纪年代，一些学者就对右旋异紫堇定的生物活性展开了研究。年，在娃、小鼠、兔、猫、狗等动物中进行了右旋异紫堇定药理实验，结果表明右旋异紫堇定产生的作用强度与药物刘量和物种有关。对于蛙和小鼠，小劍量药理作用很弱，大刻量会引起惊厥；对于猫和狗，中劍量产生僵直性昏厥，大劍量则导致多动状态上世纪年代，通过大量实验发现，右旋异紫堇定对豚鼠回肠、输精管、胆总管、胆囊、子官、胆道口括约肌，兔十二指肠、胆道口括约肌，主动脉条、门静脉条，牛冠状动脉条，小鼠输精管和大鼠子宫等多个种属的离体内脏平滑肌具有非特异性松池作用，解痉强度接近舉粟碱。

右旋异紫堇定对去甲肾上腺素预收缩的离体兔动脉条呈现刑量依赖性松池作用，其血管舒张机理与激活鸟苷酸环化酶而导致的积聚有关。研究发现右旋异紫堇定既能抑制细胞对甸离子的摄取，也能抑制甸离子从细胞内的释放，对去甲肾上腺素预收缩的兔主动脉有显著的舒张作用，是一种潜在的肾上腺素受体拮抗；右旋异紫堇定具有较强的抗疾原虫活性，对恶性疾原虫的约为抗疾活性强于青藤碱、华防己碱，但弱于去甲紫堇定和紫堇定；右旋异紫堇定可显著对抗和氯仿齊上腺素诱发的大和兔的心律失常，明显碱慢大鼠心率，提高豚鼠对夸巴因心脏中毒的耐量课题组年的一系列研究表明，右旋异紫堇定通过诱导期细胞周期停滞和细胞调亡，降低细胞的比例，大幅降低和细胞的致癌性；优先杀死细胞，显著降低肝癌细胞系中的细胞比例，有效的抑制肝癌细胞系。

右旋异紫堇定(Isocorydione)对人宫颈癌Siha细胞增殖的影响。以100、200、400、800、1200μmol/L浓度的右旋异紫堇定对人宫颈癌Siha细胞体外干预，分别作用24、48、72h后，采用MTT法检测右旋异紫堇定对人宫颈癌Siha细胞生长增殖的作用；流式细胞仪检测右旋异紫堇定对人宫颈癌Siha细胞周期的影响；结合Hoechst染色观察处理后Siha细胞核微形态的变化；WesternBlot法检测右旋异紫堇定对人宫颈癌Siha细胞作用后凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3表达的影响。结果：MTT结果显示不同浓度的右旋异紫堇定作用于人宫颈癌Siha细胞后具有明显的抑制其增殖的作用，呈剂量-时间依赖关系(P<0.05)；流式细胞仪检测结果显示400μmol/L的右旋异紫堇定作用于人宫颈癌Siha细胞后，细胞周期发生明显改变，其中G1和S期细胞比例变化不明显，但G2期细胞明显碱少(P<0.05)；Hoechst染色结果显示，与对照组比较，400μmol/L的右旋异紫堇定作用于Siha细胞48h后形态缩小、细胞核固缩，出现核碎裂形成凋亡小体；WesternBlot结果显示400μmol/L的右旋异紫堇定分别作用于人宫颈癌Siha细胞24、48、72h后，其Bax蛋白表达增加，而Bcl-2蛋白表达逐渐碱少，Bax/Bcl-2比值增加，Caspase-3蛋白表达逐渐增多。结论：右旋异紫堇定对人宫颈癌Siha细胞增殖具有明显的抑制作用，其促使细胞发生凋亡行为可能与线粒体凋亡途径的蛋白有关。

制备^[1]

一种利于大生产操作、产品纯度高的异紫堇定的制备方法。采用下列技术方案：取金线吊乌龟新鲜块根，加入其重量8-15倍量体积的pH＝1-5的酸水30-80℃下浸泡12-72小时，分离药液，滤过，浓缩，加入等体积氯仿萃取3-8次，合并氯仿层，无水硫酸钠脱水，回收溶剂，残渣加入甲醇溶解，放置析晶，分离结晶，加入无水乙醇重结晶，分离、洗涤、干燥即得。

主要参考资料

[1] CN200910233822.3一种异紫堇定的制备方法

[2] 异紫堇定碱对人宫颈癌Siha细胞增殖影响的实验研究

[3] 中药紫金龙中异紫堇定碱和原阿片碱的药物代谢及动力学研究