硫代氧化型辅酶 I的结构特性与检测方法

硫代氧化型辅酶 I是一种科研生物酶，可作为诊断试剂原料，可用于总胆汁酸（TBA）试剂的制备。硫代氧化型辅酶 I也是一种由硫代腺苷二核苷酸（Thio-NAD）或硫代核苷酸二磷酸酯（S-NAD）组成的辅酶，又被称为硫代-NAD或Thio-NA或S-NAD，它在生物体内的主要功能是作为氧化还原反应的辅助剂，参与细胞呼吸、光合作用和其他能量代谢过程。

图1 硫代氧化型辅酶 I的化学结构式

结构特性

作为NAD的硫代衍生物，硫代氧化型辅酶 I具有独特的化学性质和反应活性。在结构上，它通过在NAD的核苷酸骨架上引入硫原子而形成，这种引入使得硫原子替换了腺嘌呤环上的氮原子。这种替换赋予了S-NAD独特的性质和功能，使其在生物体内发挥重要的作用。硫代氧化型辅酶 的最大吸收波长为 405 nm。同时硫代氧化型辅酶 I 是一种有效的 NAD⁺ 激酶抑制剂——NAD⁺ 激酶能够调节 NAD 水平，从而增强对癌细胞的毒性。此外，硫代氧化型辅酶 I 还可用于替代 NAD 参与某些酶反应中的动力学测定，例如在基于 Thio-NAD 与 NADH 的循环酶法中被广泛应用。

检测方法

研究人员报道了一种定量检测硫代氧化型辅酶 I的循环酶检测方法。该方法采用pH 8.5-10.5的Tris-HCl缓冲液体系，其中包含一定量的辅酶I（NADH）、脱氧胆酸钠溶液、3α-羟类固醇脱氢酶（3α-HSD）及海藻糖，并加入含有硫代氧化型辅酶 I的待测样品。在反应体系中，3α-HSD催化胆酸钠或脱氧胆酸钠脱氢氧化生成3α-酮类固醇，同时将硫代氧化型辅酶 I还原为还原型硫代辅酶（Thio-NADH）；与此同时，在NADH的存在下，3α-HSD可将3α-酮类固醇重新还原为胆酸钠或其衍生物，同时将NADH氧化为NAD⁺。反应中生成的Thio-NADH在405 nm处具有最大吸收峰，通过测定37℃反应一段时间后该波长下溶液的吸光度值，即可计算出待测样品中硫代氧化型辅酶 I的含量。该检测方法绿色环保，所用试剂稳定性良好，尤其适用于硫代氧化型辅酶 I的批量检测。[1]

参考文献

[1] 商纯尔,陈青松.一种定量检测硫代氧化型辅酶i的循环酶检测方法和试剂盒:CN 201110298422[P].