地骨皮甲素的应用

背景及概述^[1][2]

地骨皮甲素是一种从地骨皮中分离出的生物碱类物质，具有显著降压作用。

地骨皮为茄科植物枸杞的干燥根皮。春初或秋后采挖根部，洗净，剥取根皮，晒干，用于阴虚潮热、骨蒸盗汗、肺热咳嗽、咳血、内热消渴等症。现代药理学研究表明其具有降血压、降血糖、调血脂、解热、抗菌及抗病毒等活性。

制备^[1]

一种地骨皮甲素的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1）取地骨皮粉碎20-80目，置于CO₂超临界萃取罐中萃取，通入液态CO₂，流量为1-4ml/min/g原料，同时通入甲醇做夹带剂，流量为1-4ml/min/g，原料萃取温度40-50℃，压力15-30Mpa，萃取时间1-3h，解析得萃取物；

2）上述萃取物用甲醇溶液溶解过氧化铝短柱，收集液体浓缩，再用高速逆流色谱仪分离，紫外检测器在线监测，收集流分减压干燥即得。

举例：

取地骨皮5kg，粉碎60目，置于CO2超临界萃取罐，通入液态CO2，流量为2ml/min/g原料，同时通入90%甲醇做夹带剂，流量为2ml/min/g，原料萃取温度40℃，压力23Mpa，萃取时间2h，解析萃取物用99%甲醇溶液溶解，过氧化铝短柱（250g中性氧化铝，粒度120-200目）收集液体浓缩，得浸膏。取氯仿、甲醇、水，按3:2:3混合，取上相做固定相、下相为流动相，主机转速850rpm，流速为2ml/min，紫外检测器在线监测，收集流分减压干燥，得地骨皮甲素，经HPLC检测，含量98.3%。

应用^[2]

一、CN201310522480.3报道了一种地骨皮醇提物、地骨皮甲素及乙素具有神经保护的新用途，其特征是：地骨皮醇提物、地骨皮甲素、地骨皮乙素具有修复损伤神经细胞活性的作用。地骨皮醇提物、地骨皮甲素及乙素具有神经保护的新用途，其特征是地骨皮醇提物、地骨皮甲素、地骨皮乙素作为治疗神经退行性疾病、创伤性脑损伤、中风中药物的应用。附图3为地骨皮甲素对由过氧化氢损伤的SH-SY5Y细胞株的修复结果示意图。

二、地骨皮甲素和地骨皮乙素对成骨细胞增殖和分化具有刺激作用。成骨细胞在分化时表现出特异性碱性磷酸酶(AKP)活性。所述治疗剂通过增加或刺激碱性磷酸酶(AKP)基因和/或蛋白质的表达和/或活性来增加骨生长，导致骨健康的增强。因此，所述治疗剂以及包括该治疗剂的组合物可用于治疗和/或预防骨疾病(例如骨质疏松症等)以及用于增强骨健康。地骨皮甲素和地骨皮乙素可以适用于治疗骨质疏松症，这通过其对成骨细胞的分化和增殖的促进作用证实。成骨细胞在分化后表现出特定的AKP活性。

合成^[3]

1.将2g 3,4-二羟基苯甲醛溶于20mL丙酮中，搅拌下加入4.4g碳酸钾，室温半小 时后加入5.45g溴苄，加热回流6小时。反应结束后加蒸馏水20mL，乙酸乙酯 萃取(20mL×3)，合并有机相，用饱和食盐水洗涤一次，无水硫酸钠干燥。减压 蒸去乙酸乙酯，加入少量加入析出沉淀，抽滤，滤饼用少量甲醇洗涤，得产品 4.06g，产率90％。

2.将4g 3,4-二苄氧基苯甲醛和2.6g丙二酸溶于20mL1,4-二氧六环，加入1mL 吡啶，0.5mL哌啶，回流8小时后冷却至室温，将反应物倒入冰水混合物中， 析出白色沉淀，抽滤，水洗滤饼至中性，得白色固体4g，产率90％。

3.将8g 3,4-二苄氧基苯丙烯酸和5gN-羟基琥珀酰亚胺溶于150mL干燥的THF 中，冰浴搅拌下加入6.8gDCC，冰浴反应1小时。室温反应20小时，过滤后取 滤液，减压蒸干。柱层析(二氯甲烷：甲醇＝100:1)得白色固体8.8g，产率86％。

4.将3g上述中产物溶于干燥的二氯甲烷，冰浴下将其滴入0.6g精胺的干燥二 氯甲烷溶液中，产生白色沉淀，冰浴下反应4小时。反应结束后抽滤，滤饼用冷 的二氯甲烷洗涤。滤饼冷冻过夜后用氯仿和5％碳酸氢钠萃取，有机相用5％氢 氧化钠洗涤三次，饱和氯化钠洗涤一次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓 缩得白色固体2.3g，产率40％。

5.将原料先溶于甲醇(40mL)，再加入冰乙酸(1mL)，溶液澄清，加入钯碳， 氢气室温催化，反应6小时，抽滤除去钯碳，减压浓缩，得产品。产率40％。

地骨皮甲素¹H-NMR(CDCl3，400MHz)数据如下：δ1.55(4H,m,H-5′)，1.65(4H,m, H-2′)，2.33(4H,m,H-8)，2.59(4H,m,H-4′)，2.68(4H,m,H-3′)，2.86(4H,m,H-7)， 3.42(4H,m,H-1′)，6.75(2H,d,J＝2.1Hz,H-2)，7.05(2H,dd,J＝2.1,8.1Hz,H-6)， 7.50(2H,d,J＝8.1Hz,H-5)。

主要参考资料

[1] CN201310360097.2 一种地骨皮甲素的制备方法

[2] CN201310522480.3 地骨皮醇提物、地骨皮甲素及乙素具有神经保护的新用途

[3] CN201610343699.0 地骨皮甲素及类似物的合成方法