去氢齿孔酮酸的制备方法

发布日期:2020/10/18 17:56:53

背景及概述^[1]

苓皮为多孔菌科真菌茯苓(Poriacocos(Schw.)Wolf)的干燥菌核外皮。中医学认为，茯苓味甘、淡、性平，具有利水渗湿、益脾和胃、宁心安神之功效。目前已有研究表明，茯苓皮具有免疫调节、抗肿瘤、抗惊厥、抑菌抗炎等作用。对茯苓乙醇提取物对肾病综合征的药效学及药动学进行研究，并指出茯苓三萜中去氢土莫酸、土莫酸、去氢茯苓酸、茯苓酸为茯苓乙醇提取物发挥药效的物质基础。然而，与茯苓相比，茯苓皮化学成分复杂，有多糖、三萜、脂肪酸、甾醇、酶等，其中多糖和三萜类物质为主要的活性成分，有研究表明茯苓皮中的三萜类物质含量远高于茯苓菌核。茯苓皮的提取物主要有效成分为3β-羟基-羊毛甾7，9(11)，24-三烯-21-酸和去氢齿孔酮酸，与茯苓乙醇提取物中有效成分明显不同。

制备^[1]

去氢齿孔酮酸提取制备如下：

(1)将茯苓皮用质量分数为1.5％的盐酸冲洗，然后用水冲洗至中性，晾干；

(2)将茯苓皮用体积分数为70％的乙醇溶液回流提取2次，每次提取时间为0.5h，茯苓皮与乙醇溶液的用量为1：10(g/ml)，合并提取液，提取液回收乙醇至干；

(3)将步骤(1)的干物质用水溶解成溶液，加入体积比为7：1.5的正丁醇和乙酸乙酯的混合物萃取，正丁醇和乙酸乙酯的混合物的体积为水溶液的2倍，有机相回收溶剂至干，得粗品；

(4)粗品用100-120质量倍的乙醇溶解，配成溶液，所得溶液上中性氧化铝层析柱，中性氧化铝的质量为粗品的15倍，然后用乙醇和乙酸乙酯体积比为2：5的混合物进行洗脱，乙醇和乙酸乙酯混合物的用量为氧化铝的2倍，收集洗脱液；

(5)向洗脱液中加入活性炭，活性炭用量为粗品质量的3％，加热至沸腾并保持30min，趁热过滤，用乙醇洗涤活性炭，合并滤液及洗液，浓缩至原体积的1/3，静置沉淀、过滤、干燥，得茯苓皮三萜。对提取物中羟基-羊毛甾7，9(11)，24-三烯-21-酸和去氢齿孔酮酸的含量进行测定，精密吸取上述对照品溶液及供试品溶液各10μL，分别注入液相色谱仪中。根据峰面积计算，3β-羟基-羊毛甾7，9(11)，24-三烯-21-酸含量为30.15％，去氢齿孔酮酸含量为28.19％，两种物质共计58.34％。