毛冬青皂苷甲的检测

背景及概述^[1-2]

毛冬青药材为冬青科冬青属植物毛冬青IlexpubescensHooketArm的干燥根，生长在我国南方地区，具有清热解毒，活血通脉，消肿止痛的功效。近年来对毛冬青的许多研究证明毛冬青药材中含有大量的皂苷类活性物质。毛冬青药材中含有多种化学成分，除主要活性成分三萜皂苷类之外，还包括黄酮类、木脂素类、简单酚类、香豆素类及糖类等。研究显示三萜皂苷类具有明显的药理作用，是近年来毛冬青研究者的重点和热点。而且，随着毛冬青研究课题的深入，陆续提取分离到一些新的三萜皂苷类化合物。

迄今为止，通过对毛冬青不同药用部位的提取分离，经鉴定明确的皂苷类成分有毛冬青酸(Ilexolicacid)、毛冬青皂苷甲(IlexsaponinA)、IlexsaponinA1、IlexpulblesninA、IlexpulblesninB、毛冬青皂苷B(IlexsaponinB)、毛冬青皂苷B1(IlexsaponinB1)、毛冬青皂苷B2(IlexsaponinB2)、毛冬青皂苷B3(IlexsaponinB3)、具栖冬青苷(Pedunculoside)、冬青苷O(IlexosideO)、冬青素A(IlexgeninA)、毛冬青甲素(Ilexonin)、毛冬青皂苷D(IlexsaponinD)、齐墩果酸-3-O-β-D-木糖苷、长梗冬青苷、泰国树脂酸-28-O-β-D-葡萄糖酯和冬青素B-28-O-β-D-葡萄糖苷的混合物等。

检测^[2-3]

毛冬青皂苷甲的检测。采用ODS色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)及保护柱，以甲醇－(体积分数)0.2%冰醋酸(67∶33)为流动相，蒸发光散射检测器，漂移管温度95℃，载气流速2.5L·min^－1，柱温30℃，流速1.0mL·min^－1为毛冬青皂苷甲高效液相色谱法含量测定的色谱条件，结果显示毛冬青皂苷甲在1.92～9.60μg线性关系良好(r=0.9995)，平均回收率为99.85%，ＲSD为1.04%；实验所测艾可清胶囊中毛冬青皂苷甲的含量分别为：(10.89±0.04)mg·g^－1，(11.23±0.03)mg·g^－1，(10.46±0.06)mg·g^－1。

还有研究建立了艾可清胶囊中毛冬青皂苷甲的硅胶薄层色谱(TLC)鉴别方法和高效液相色谱-蒸发光散射(HPLCELSD)检测的含量测定方法。方法：自药材中分离鉴定毛冬青皂苷甲；确定TLC条件；采用ODS色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)及保护柱，以甲醇-0.2%冰醋酸(67∶33)为流动相，ELSD检测器，漂移管温度95℃，载气流速2.5L·min^－1，柱温30℃，流速1.0mL·min^－1作为HPLC条件。

结果：设立的TLC条件可以从复方制剂中检出毛冬青皂苷甲；建立的HPLC含量测定方法，毛冬青皂苷甲在1.92～9.60μg呈良好线性关系(r=0.9995)，平均回收率为99.85%，RSD1.04%。建立的毛冬青皂苷甲的硅胶TLC鉴别方法和HPLC-ELSD含量测定方法具有操作快捷、方法准确的特点，可作为毛冬青药材及其复方制剂的质量控制方法。

药物代谢动力学^[2]

研究表明大鼠尾静脉注射IlexsaponiA(30mg·kg－1)后，在体内呈二室模型分布，主要药代动力学参数为：t1/2(ɑ)=3.542min，t1/2(β)=17.636min，CL=0.02L·min－1·kg^－1，AUC(0→1)=1096mg·min·L^－1，tmax=5min，Cmax=52.972mg·L^－1。表明静脉给药后，毛冬青皂苷甲在大鼠体内分布和消除迅速。

采用高效液相色谱法研究大鼠肠内菌对毛冬青皂苷甲的代谢转化，结果表明，离体培养大鼠肠内菌，毛冬青皂苷甲主要代谢为冬青素A；大鼠在体实验中，尿液中未检测到原型物及代谢物，粪便中检测到原型物和代谢物；毛冬青皂苷甲经口给予后，89.85%经肠内菌群代谢后被排出体外，其中15.58%以原型物毛冬青皂苷甲，74.27%以代谢产物冬青素A排出体外。

主要参考资料

[1] 毛冬青药材中毛冬青皂苷甲和毛冬青皂苷B2的含量测定的研究

[2] 毛冬青中三萜皂苷类成分的研究进展

[3] HPLC-ELSD法测定艾可清胶囊中毛冬青皂苷甲的含量