松树皮提取物的制备

背景及概述^[1][2]

松树皮提取物是一种安全、高效的天然抗氧化剂。经动物和体外试验、流行病学证据和临床初步研究表明：松树皮提取物对人类健康有多样的益处，如保护血管，清除自由基，防治心脏病、高血压、癌症、关节炎、眼底视网膜出血、儿童多动症、老年痴呆，提高免疫功能等。世界自由基生物与医学委员会主席Lester Packer博士指出：松树皮提取物是目前各实验室和科学文献中发现的功效最强的天然抗氧化剂。

目前，全世界的医学、食品科学、营养学期刊上已有超过500篇有关松树皮提取物的药理和临床报告，在营养保健、强身美容、防病治病、抗衰防老等方面都发挥重要作用，已成为天然抗氧化剂研究和开发的一大热点。

松树皮提取物是由四十多种具有水溶性、高生物活性的抗氧化剂组成的混合物，其中包括有低聚前花青素和有机酸。低聚前花青素，也称低聚原花青素，英文名称Oligomeric Procyanidin，是松树皮提取物的主要成分，由以儿茶素或表儿茶素作为单元通过C-C键结合形成的二聚体、三聚体、四聚体、五聚体、六聚体、七聚体等低聚体所组成。

松树皮提取物中还含有咖啡酸、没食子酸、阿魏酸、p-香豆酸、羟基-肉桂酸、香草酸和原儿茶酸等有机酸。经研究表明，松树皮提取物的抗氧化作用是维生素C的20倍、是维生素E的50倍。在防病治病、抗衰防老、营养保健、强身美容等方面都发挥重要作用，被认为是继维生素C、维生素E、β-胡萝卜素之后的抗氧化剂，松树皮提取物在药品、食品和化妆品等领域具有巨大的应用前景。

理化性质及结构^[1]

松树皮提取物是从法国西南部朗德地区沿海松树(pinuspinaster)树皮中提取的,商品名为PyenonolÀ(碧萝芷)。其历史可追溯到1534年,一名法国探险家JaequeoCaltier在一次探险经历后将其从北大西洋土著居民手中带回法国。400多年后,随着对类黄酮类物质的活性研究的开展,它开始引起人们的注意。也有人将其他种类的树皮提取物称之为碧萝芷,它成为树皮提取物中具有抗氧化活性的多种成分的代名词。

松树皮提取物的主要成分是水溶性极高的原花青素低聚物(60%一65%),同时还有其他四十余种水溶性成分,其中多数为有机酸,包括咖啡酸、原儿茶酸、香草酸、阿魏酸、没食子酸等,以及葡萄糖脂和其他对人体有用的生物活性成分。松树皮提取物在紫外检测下的组分见图1。(略)精制后的松树皮提取物是一种有流动性的精细粉末,微带红棕色,有芳香,人口略带涩味。在干燥环境中非常稳定,避光保存可长达5年之久,其中原花青素仅损失1%。

松树皮提取物

制备^[2]

1.1、浸提：将收集的松树皮加入8倍50～70％的乙醇，分3次对松树皮进行浸提，次3小时，第二次2.5小时，第三次2小时，浸提温度70度，然后收集提取液。

1.2、乙醇回收：真空蒸发提取液，回收乙醇，提取液加水冷却备用。

1.3、离心：将提取液经三级离心，分别1000转/min、4400转/min、14000转/min，离心后收集上清液。其中，一级离心主要是除去提取液中的大颗粒杂质，二级离心主要是除去提取液中的小颗粒杂质，三级离心主要是除去提取液中的微小颗粒杂质，通过三级离心，可有效除去浓缩液中固体杂质及不溶于水的颗粒物质，防止浓缩液上柱后对层析柱造成污染，难以再生。

2、上柱解吸

2.1、次过柱

将经过离心处理的提取液过径高比为1∶10的大孔树脂层析柱，大孔树脂层析柱需预先进行清洗以确保清洁即树脂再生，先采用碱洗，后用纯化水冲洗至中性，然后用酸洗至PH值～4，再用，纯化水冲洗至中性，提取液过完后，用纯化水过柱洗至流出液澄明，除去在大孔树脂层析柱中的大分子物质，然后用5～15％的乙醇如5％、10％、15％的乙醇，分批淋洗至洗出液澄明，以除去大孔树脂层析柱中的，分子量与大孔树脂孔径不相适应的物质，然后用70％的乙醇解吸大孔树脂层析柱中的有效成分，解吸完毕后，收集解吸液，减压回收乙醇。

2.2、第二次过柱

将经过次过柱的解吸液过径高比为1∶30的大孔树脂层析柱，径高比为1∶30的大孔树脂层析柱，即孔径为500mm，高度为15m的大孔树脂层析柱，大孔树脂层析柱需预先进行清洗以确保清洁即已经再生，放样，过完后，用纯化水过柱洗至流出液澄明，然后分别依次用30％、50％、70％的乙醇淋洗三次(30％一次，50％一次，70％一次)，分别收集解吸液，减压回收乙醇，浓缩成稠膏后，真空干燥即得松树皮提取物。大孔树脂层析柱，由于提取液经次过柱后，已十分干净(没有过多杂质)，因此用95％浓度的乙醇清洗，即可实现树脂再生。

主要参考资料

[1] 徐璐, & 郑建仙. (2005). 松树皮提取物的研究进展. 食品工业(4), 36-38.

[2] 毛绍春, 李竹英, & 李聪. (2007). 云南松树皮提取物抗氧化活性的研究. 特产研究, 29(2), 12-14.

[3] 崔映宇, 谢衡, 赖斐, & 王金发. (2004). 马尾松树皮提取物的抗氧化性初步研究. 食品科学, 25(9), 179-183.