对甲苯胺蓝的应用

背景及概述^[1][2]

对甲苯胺蓝是一种有机试剂，为提高外阴癌活检阳性率的外用药物。将1%对甲苯胺蓝溶液涂抹外阴部，过2～3分钟干燥后再用1%醋酸脱色，如有非典型增生，原位癌或浸润癌病变区域呈紫蓝而不脱色。在不脱色区作活检可提高早期诊断及多发中心性癌诊断的阳性率。但此种方法对良性溃疡可致假阳性；而对非典型病变区表面角化亢进者，经醋酸洗后可脱色而得假阴性结果。

药理作用^[2]

木材是我国可持续发展战略的重要部分，木材腐朽是破坏木材质量的主要途径之一，白腐菌是多种木腐菌中破坏木材细胞壁最为严重的。为抑制病原菌，提高木材利用率，于洪枫等人利用低毒、低污染的对甲苯胺蓝(TB)介导的光动力疗法对白腐菌抑制作用进行研究。通过牛津杯法测试不同浓度的TB(0. 01、0. 02、0. 05 mg/m L)作用于白腐菌时，没有观察到抑菌作用。当采用低功率的630nm激光激发TB时，发现三组浓度光敏剂TB对白腐菌均起到抑制作用，随TB浓度增加抑菌率分别为69.67%、91. 21%、99. 44%。实验结果表明:对甲苯胺蓝介导的光动力疗法对白腐菌具有较好的抑菌效果，且光敏剂浓度与其抑菌效果呈现正相关性，体现了良好的木材防腐效果。

应用^[3-5]

一、CN201310599323.2提供一种对甲苯胺蓝-DNA酶琼脂培养基，所述培养基的组分包括15.5g/L 7.5%氯化钠肉汤、0.5g/L DNA、1.5g/L氯化钙、6.3g/L三羟甲基氨基甲烷、0.088g/L对甲苯胺蓝，pH值为8.9-9.1。

所述的对甲苯胺蓝-DNA酶琼脂培养基的应用，用于核糖核酸酶检测。

具有脱氧核糖核酸酶的细菌分解培养基中的脱氧核糖核酸(DNA)，使DNA长链水解成数个单核苷酸的寡核苷酸短链，使指示剂对甲苯胺蓝作用变成粉红色；氯化钙提供阳离子作为激活剂；氯化钠维持均衡的渗透压；三羟甲基氨基甲烷为缓冲剂；琼脂为培养基的凝固剂。

称取本品 27.58g，加热溶解于1000ml 蒸馏水中，分装三角瓶。

如立即使用可不需灭菌。如不立即使用，121℃高压灭菌 15 分钟。

已灭菌的培养基在室温可存放 4个月无变化，并经数次熔化后仍可用。   

本发明的有益效果：

1、培养基组方简单，制备操作方便，成本低，利于推广应用；

2、菌生长迅速，变异率低；

3、便于观察，分析。

二、CN201110054955.1公开了用于筛选口腔内膜细胞早期病变的组合试剂，包括：作为检测试剂生化试剂的对甲苯胺蓝，作为检测试剂辅助试剂的醋酸，所述对甲苯胺蓝溶液的浓度为0.2~2%，所述醋酸溶液的浓度为0.01~5%。本发明还公开了用于筛选口腔内膜细胞早期病变的组合试剂的使用方法，其特征在于：首先用醋酸漱口1-2分钟，再用对甲苯胺蓝与醋酸混合溶液漱口1-2分钟，最后用醋酸漱口1-2分钟，所述的对甲苯胺蓝与醋酸混合溶液的配比为：1∶0.5-1。

三、CN201610342904.1提供一种基于石墨炔对甲苯胺蓝复合材料的真菌毒素免疫传感器的制备方法及应用

（1）用Al₂O₃抛光粉将直径4 mm的玻碳电极打磨平滑，超纯水清洗干净；将5 ~ 8 µL、0.4 ~ 4 mg/mL石墨炔@对甲苯胺蓝Gy@TB复合材料滴加到电极表面，超纯水冲洗，室温下晾干成膜；

（2）滴加3 ~ 8 µL，质量分数为0.1% ~ 5%的羟丙基壳聚糖在电极表面，超纯水冲洗，室温下晾干；

（3）滴加1 ~ 5 µL，质量分数为0.1% ~ 1%的戊二醛水溶液在电极表面，超纯水冲洗，室温下晾干；

（4）依次滴加5 ~ 8 µL真菌毒素抗体，5 ~ 8 µL、质量分数为0.5% ~ 3%的牛血清 白蛋白BSA溶液于电极表面，超纯水冲洗，4℃冰箱中晾干；

（5）滴加5 ~ 8 µL、0.06 ~ 40 ng/mL的一系列不同浓度的真菌毒素抗原标准溶液 至电极表面，超纯水冲洗，4℃冰箱中晾干。

石墨炔@对甲苯胺蓝Gy@TB复合材料的制备：将1 ~10 mg的石墨炔Gy和0.5 ~ 5 mg的对甲苯胺蓝TB加入0.5 ~ 5 mL的超纯水中， 室温振荡24 h，得到复合材料石墨炔@对甲苯胺蓝Gy@TB。

一种基于石墨炔对甲苯胺蓝复合材料的真菌毒素免疫传感器的制备方法及应 用，所述的真菌毒素，选自下列之一：呕吐霉素，玉米赤霉烯酮，伏马毒素，黄曲霉毒素B1，赭曲霉毒素。

本发明的有益成果

（1）石墨炔的使用，实现了对传感器底层比表面积成功放大，同时能够很好的促进 电极表面的电子传递。

（2）石墨炔@对甲苯胺蓝Gy@TB复合材料的使用，使得信号分子得以增加，扩展了传感 器的线性范围，降低了检出限。

（3）羟丙基壳聚糖的使用，增强了传感器表面Gy@TB复合材料的牢固固载，同时实现了对抗体的化学键连接，实现了超灵敏稳定检测。

主要参考资料

[1] 中华性医学辞典

[2] 于洪枫，牟洪波，戚大伟，俞莹.对甲苯胺蓝介导的光动力疗法对一种白腐菌的抑制[J].森林工程，2019，35(02):50-54+81.

[3] CN201310599323.2 一种对甲苯胺蓝-DNA酶琼脂培养基及其应用

[4] CN201110054955.1 用于筛选口腔内膜细胞早期病变的组合试剂及其使用方法

[5]CN201610342904.1 一种基于石墨炔对甲苯胺蓝复合材料的真菌毒素免疫传感器的制备方法及应用