覆盆子提取物的应用

背景及概述^[1][2]

覆盆子(Fructus rubi)为蔷薇科悬钩子属植物掌叶覆盆子(Rubus chingii Hu)的干燥近成熟果实。甘、酸，温。归肾、膀胱经。益肾，固精，缩尿。用于肾虚遗尿，小便频数，阳痿早泄，遗精滑精等症。覆盆子在我国资源丰富，主要分布于浙江、江苏、安徽、江西、福建、广西等地。

以覆盆子为原料的覆盆子浸膏、覆盆子提取物在卷烟中应用广泛，具有丰富烟香、柔和细腻烟气、增加烟气浓度、降低刺激性的作用。

覆盆子提取物

应用^[3]

覆盆子不同溶液提取物与氟康唑联合使用后均表现出协同关系，与临床敏感菌相比，覆盆子提取物与氟康唑联合后对临床耐药菌的协同关系更显著，抗真菌作用更明显，MIC80测定值可从单用时大于0．08mg/mL，降至合用后的0．04mg/mL以下;除对C．albican32、C．albican842、C．albican557，氟康唑的MIC80测定值均从大于64μg/mL降至0．125～1μg/mL。另外，覆盆子提取物与不同唑类药物合用均有协同关系，其MIC80测定值由单用时大于10mg/mL降至0．04mg/mL。以上实验结果可以看出覆盆子提取物本身有一定的抗真菌。

覆盆子提取物的功效成分鞣花酸，能降低酪氨酸酶和过氧化氢酶的活性，从而减少黑色素细胞的代谢强度，减少黑色素的生成，而达到祛斑作用。鞣花酸在整个紫外线区域均有较强的吸收作用，可以通过吸收紫外线起防晒或清除自由基的作用。有报道，覆盆子提取物纯品4周后可使受试者皮肤色素沉着得到明显改善，紫外线照射引起的红斑受到抑制。

此外，覆盆子提取物含有丰富的类黄酮素和维生素C，能有效抑制黑色素的形成，不但对肌肤有活化和修复功效，还具有美白作用。覆盆子提取物的人体试食观察结果显示，试食组按要求服用30d后，黄褐斑面积减少(1000±840)mm2(自身前后比较P＜0.05)，面积减少百分比为(17.14±10.52)%;颜色积分下降(0.20±0.34)分(自身前后比较P＜0.01);且未产生新的黄褐斑。试食组有效34例，有效率68.00%。试食组试食后黄褐斑面积及颜色积分与对照组比较，差异均有显著性(P＜0.01)。根据《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)中祛黄褐斑功能判定标准，可以认定覆盆子提取物有祛黄褐斑的作用。

制备^[2]

方法一：从覆盆子制备覆盆子提取物

S1、取覆盆子药材，除杂水洗，晾干，粉碎并过800目筛，得覆盆子粉末；

S2、将覆盆子粉末按20mL/g液料比加入体积百分比浓度为70％的乙醇水溶液，搅拌均匀，在25kHz、450W和45℃下超声提取45min，提取2次；

S3、将步骤S2中的醇提混合物过滤，得覆盆子醇提液，随后浓缩得到体积为覆盆子醇提液体积的1/8-1/6的覆盆子浓缩液；

S4、将覆盆子浓缩液在-30～-40℃下冷冻干燥25min，研磨成粉后过200目筛，即得覆盆子提取物。

经检测，上述制得的覆盆子提取物中覆盆子酮含量为1.25wt％。

方法二：固定化醋酸菌制备覆盆子提取物的方法

(1)取覆盆子干果，加入其重量2～6倍的水，浸泡12-24h，在95～100℃下回流提取2～3次，每次提取时间为5～8小时，提取完后冷却至室温，并过滤得到提取液，合并多次提取液，得到覆盆子提取物A；

(2)将醋酸菌接种到肉汤培养基中，在温度37℃、搅拌转速为50rpm的条件下培养48小时，取培养液于8000rpm下离心，离心后的湿菌体备用；

(3)醋酸菌的聚乙烯醇-海藻酸钠固定化：采用聚乙烯醇水溶液与海藻酸钠水溶液配制含质量百分比6％～10％的聚乙烯醇和质量百分比1％～3％的海藻酸钠的混合溶液，然后向混合溶液中加入总溶液体积的2～5％的步骤(2)中制备的醋酸菌湿菌体，配制成混合液，用蠕动泵经过1～5mm孔径的针头将配制好的混合液逐滴加入到CaCl2的质量百分比为1～3％的硼酸饱和溶液中，交联1h形成小球，然后将小球取出再加入饱和Na2SO4溶液中交联3-5h，得到PVA-SA固定化醋酸菌小球，最后采用无菌水冲洗，烘干备用；

(4)将覆盆子提取物A与步骤(3)中烘干的PVA-SA固定化醋酸菌小球按照质量比5～10:1混合，在温度为30～37℃，搅拌转速为1～5rpm的条件下发酵2～4d，然后置于4℃冷柜中静置7～14d；

(5)将步骤(4)发酵后发酵液过滤，得澄清发酵液，并将发酵液进行冷冻干燥，其冷冻干燥的料液厚度为1～2厘米，真空度为10Pa，干燥时间为6～12h；

(6)将步骤(5)冷冻干燥后的发酵液，加入其质量2～4倍的80～95％酒精溶液，沉淀24～48小时，过滤取上清液在压力为0.1MPa，温度为45℃的条件下浓缩至相对密度为1.10～1.15，得覆盆子提取物。

主要参考资料

[1] 张石群, 林辉, 苗琦, 刘伟, 曹永兵, & 姜远英. (2012). 覆盆子提取物联合唑类药物抗真菌活性研究. 中国真菌学杂志, 7(1), 4-7.

[2] 陆维克, & 张蕾. (2011). 覆盆子提取物抗氧化活性研究. 广州化工, 39(18), 82-84.

[3] 谢欣梅, & 庞晓斌. (2013). 覆盆子提取物对2型糖尿病大鼠糖脂代谢的影响及对肝脏保护作用的研究. 中成药, 35(3), 460-465.