2'-脱氧尿苷-5'-三磷酸三钠盐的相关应用研究

2'-脱氧尿苷-5'-三磷酸三钠盐又称脱氧尿苷三磷酸，是一种核苷酸三磷酸盐化合物。它是由2'-脱氧尿苷和5'-三磷酸盐组成的。该化合物通常呈白色结晶或粉末状，可溶于水。2'-脱氧尿苷-5'-三磷酸三钠盐在生物化学和分子生物学领域具有广泛的应用。其中之一是作为抑制剂来研究DNA或RNA合成的机制。它也被用作生物技术和基因工程中的试剂，用于合成特定的DNA或RNA序列。

应用研究

1、张梦垚建立了基于热循环仪的副溶血性弧菌荧光PCR检测方法。针对副溶血性弧菌的特异性不耐热溶血素基因保守区域，设计3对特异性PCR引物并进行筛选，并优化核酸提取方法和扩增体系。为减少气溶胶污染，将PCR扩增原料里的脱氧胸苷三磷酸（Deoxythymidinetriphosphate,dTTP）替换为2'-脱氧尿苷-5'-三磷酸三钠盐（dUTP），采用打开热盖的小型商业热循环仪进行PCR扩增。并将建立的PCR现场检测方法与实验室实时PCR系统检测方法相比较，结果具有一致性。该检测方案可以有效避免核酸检测过程中的气溶胶污染问题，其结果可在便携式观察仪上进行荧光可视化检测[1]。

2、崔开等人研究大鼠急性脊髓损伤后神经细胞凋亡及caspase-3、凋亡诱导因子(AIF)的表达。将78只成年健康Sprague-Dawley(SD)鼠按Nystrom法建立大鼠脊髓(T8、T9)急性压迫损伤模型,HE染色观察脊髓组织病理学变化,免疫组化测定各时间点AIF和caapase-3的表达变化,原位末端脱氧核糖核酸转移酶介导的2'-脱氧尿苷-5'-三磷酸三钠盐(dUTP)标记法(TUNEL法)检测神经细胞的凋亡水平。结果，免疫组化结果显示正常及假手术组大鼠脊髓神经细胞caspase-3,AIF,TUNEL阳性细胞较少,脊髓损伤后1d,AIF阳性细胞数明显增多(P<0.05),5d表达减弱；caspase-3阳性细胞数在脊髓损伤后8h明显增多,3d迭高峰(P<0.01),7d表达减弱。TUNEL阳性细胞数也在8h明显增多,3d达高峰(P<0.01),7d表达减弱。因此，脊髓损伤后存在广泛的细胞凋亡现象,caspase-3、AIF均参与了细胞凋亡的调节[2]。

3、脱氧尿苷焦磷酸酶(dUTP pyrophosphatase,dUTPase)广泛存在于真核、原核细胞和病毒等生物有机体中,通过催化水解2'-脱氧尿苷-5'-三磷酸三钠盐(dUTP),减少尿嘧啶在DNA合成中的错误掺入,降低细胞中的dUTP/dTTP比例,保证DNA复制的正确性和顺利进行.病毒编码的dUTPase具有种属特异性,且与病毒的毒力和高效复制密切相关。本文就dUTPase的生物学功能、分类特征、表达调控、分布定位及病毒dUTPase功能的研究进展进行了概述,为深入开展dUTPase功能研究提供理论基础[3]。

参考文献

[1]张梦垚. 基于CRISPR技术的副溶血性弧菌核酸现场检测系统的研究[D]. 浙江:浙江大学,2021. 

[2]崔开,韩亚新,董君博,等. 大鼠急性脊髓损伤后神经细胞凋亡及caspase-3、AIF的表达[J]. 中国医科大学学报,2009,38(7):508-510,532.

[3]招丽婵,程安春,汪铭书,等. 病毒dUTPase研究进展[J]. 生命科学,2008,20(2):304-308. DOI:10.3969/j.issn.1004-0374.2008.02.029.