caspase-6兔单克隆抗体

背景^[1-7]

Caspase-6 Rabbit Monoclonal Antibody(caspase-6兔单克隆抗体)是caspase-6作为抗原对兔进行免疫后筛选出只产生的caspase-6抗体的B淋巴细胞，再将B细胞通过细胞融合技术与骨髓瘤杂交然后筛选出只分泌caspase-6抗体的杂交瘤细胞，最后通过层析柱纯化制的高纯度的caspase-6抗体兔单克隆抗体。半胱天冬酶是参与细胞凋亡的起始和执行的细胞质天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶家族。

Caspase-6是一种主要的凋亡执行者。它作为前结构域蛋白存在，并被胱天蛋白酶-3切割成两个活性亚基，即18kDa和10kDa亚基。Caspase-6在许多不同的细胞内蛋白质，核纤层蛋白中切割。Lamins在维持细胞膜的完整性方面发挥重要作用，它们的切割导致随后的细胞分解和死亡。尽管众所周知caspase-6可以切割与序列VEID相邻的核纤层蛋白A，但对于胱天蛋白酶-6在体内凋亡中的作用知之甚少。

我们的研究结果表明，在缺乏核纤层蛋白A的细胞中，caspase-6似乎对于体内和体外细胞凋亡的执行是不必要的，正如染色质浓缩和核分解，寡核苷酸梯的产生，TUNEL标记和annexin-V标记所判断的与caspase-3不同，caspase-3可切割多种底物，caspase-6似乎是一种更专业的酶。

因此，除了核纤层蛋白A，其中显然没有替代的切割途径，各种半胱天冬酶-6底物必须被其他半胱天冬酶切割或对于细胞核是可有可无的，以在体内实现正常的凋亡形态。已经在哺乳动物中鉴定出14种半胱氨酸蛋白酶;与细胞凋亡有关的那些被分为两个不同的亚家族。启动子caspase亚家族成员将各种信号转换成蛋白酶活性，从而启动通过激活下游效应子或刽子手caspase而进行的caspase级联反应。活化的效应子caspase-3，-6和-7负责切割许多靶多肽，导致细胞的最终破坏。

caspase-3在凋亡执行中的作用已被广泛研究，并且发现了许多底物，从聚（ADP-核糖）聚合酶（PARP-1）开始。Caspase-6,又名为mch2,是Caspases家簇的一员,属于效应Caspase分子。Caspase-6基因编码一种34kDa、与CPP32(即Caspase-3),Ich1/Nedd2和IL-1β等高度同源的蛋白,是哺乳动物细胞中介导凋亡的重要分子,也是哺乳动物细胞凋亡的执行分子之一。

将Caspase-6基因的大小亚基进行重排,可以得到一个具有与天然活性Caspase-6分子晶体结构非常相似的分子,该分子具有天然Caspase-6的活性,可以作为CrmA和Bcl-2作用的下游分子,也能识别并切割PARP和lamin A等底物,执行细胞凋亡的功能。HER2/neu分子是癌基因erbB2的编码产物,其编码基因定位于人染色体17q21,是具有酪氨酸蛋白激酶活性的跨膜蛋白,是表皮生长因子(EGF)受体家族的成员之一。

应用^[8][9]

caspase-6兔单克隆抗体可用于研究caspase-6在癌症组织中的表达及意义

在caspase-3、caspase-6在胃癌组织中的表达及意义实验中采用RT-PCR法检测42例胃癌患者的胃癌、癌旁组织中caspase-3、caspase-6基因表达情况,并分析这2个因子与临床、病理因素之间的关系。

结果：1.caspase-3基因的表达：caspase-3基因在胃癌组织中表达率为(38.09%)16/42,较癌旁组织中表达率(78.57%)33/42低,两者之间的差异有显著性(P<0.01)。胃癌组织中caspase-3基因的表达与患者的年龄、性别和肿瘤的大小之间的差异无显著性(P＞0.05),与胃癌肿瘤浸润深度、肿瘤组织分化程度和淋巴结转移之间的差异有显著性(P<0.05)。

2.caspase-6基因的表达：caspase-6基因在胃癌组织中表达率为(30.95%)13/42,较癌旁组织中表达率(69.05%)29/42低,两者之间的差异有显著性(P<0.01)。胃癌组织中caspase-6基因的表达与患者的年龄、性别、肿瘤的大小和淋巴结转移之间的差异无显著性(P>0.05),与胃癌肿瘤浸润深度和肿瘤组织分化程度之间的差异有显著性(P＜0.05)。

3.在胃癌组织中,两者表达之间的差异无显著性(P>0.05)。结论：caspase-3、caspase-6基因的表达可能与胃癌的发生、发展相关,对胃癌发生、发展过程起到一个抑制的作用。

参考文献

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[2]Intracellular bacteriolysis triggers a massive apoptotic cell death in Shigella-infected epithelial cells[J].Ivan Tattoli,Luigi Lembo-Fazio,Giulia Nigro,Leticia A.M.Carneiro,Elisabetta Ferraro,Giacomo Rossi,Maria Celeste Martino,Maria Egle de Stefano,Francesco Cecconi,Stephen E.Girardin,Dana J.Philpott,Maria Lina Bernardini.Microbes and Infection.2008(10)

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[4]Cleavage at the Caspase-6 Site Is Required for Neuronal Dysfunction and Degeneration Due to Mutant Huntingtin[J].Rona K.Graham,Yu Deng,Elizabeth J.Slow,Brendan Haigh,Nagat Bissada,Ge Lu,Jacqueline Pearson,Jacqueline Shehadeh,Lisa Bertram,Zoe Murphy,Simon C.Warby,Crystal N.Doty,Sophie Roy,Cheryl L.Wellington,Blair R.Leavitt,Lynn A.Raymond,Donald W.Nicholson,Michael R.Hayden.Cell.2006(6)

[5]Antitumor Effects of Aminobisphosphonates on Renal Cell Carcinoma Cell Lines[J].Hardev Pandha,Lindsay Birchall,Brendan Meyer,Natalie Wilson,Kate Relph,Christopher Anderson,Kevin Harrington.The Journal of Urology.2006(5)

[6]Functional proteomics of resveratrol‐induced colon cancer cell apoptosis:Caspase‐6‐mediated cleavage of lamin A is a major signaling loop[J].Shao ChinLee,JasonChan,Marie‐VeroniqueClement,ShazibPervaiz.Proteomics.2006(8)

[7]Expression of apoptosome pathway-related transcripts in non-small cell lung cancer[J].Journal of Cancer Research and Clinical Oncology.2006(1)

[8]Active Caspase-6 and Caspase-6-Cleaved Tau in Neuropil Threads,Neuritic Plaques,and Neurofibrillary Tangles of Alzheimer’s Disease[J].Huishan Guo,Steffen Albrecht,Martine Bourdeau,Tracy Petzke,Catherine Bergeron,Andrea C.LeBlanc.The American Journal of Pathology.2004(2)

[9]饶韬.caspase-3、caspase-6在胃癌组织中的表达及意义[D].南昌大学,2011.