APS-5的合成与应用

简述

APS-5化学名称为(4-氯苯巯基)(10-甲基-9,10-二氢化吖啶亚甲基)磷酸二钠盐，化学名称为C₂₁H₁₅ClNNa₂O₄PS，分子量为489.8。常温常压下，APS-5表现为白色至淡棕色粉末，可溶于二甲亚砜、水等溶液。其中，其在水中的溶解度可以达到20mg/mL。APS-5是一种基于 9,10-二氢吖啶的化学发光底物，特征发射波长为430nm，适用于磷酸酶活性溶液测定和磷酸酶酶联免疫测定[1]。

合成方法

文献报道了一种用于免疫分析的化学发光试剂APS-5的合成方法，以廉价的吖啶酮作为主要原料，经过甲基化，氰基化，水解，还原等步骤即可得到目标物质。该合成方法具有成本低，收率高等特点，经济价值高，适合在工业上使用[2]。

应用

APS-5目前已作为发光探针被用于基因芯片的研究中，其在均相碱性磷酸酶检测中的应用表现出超高的灵敏度，（可以检测到小于10-19mol的碱性磷酸酶），能迅速达到峰值以减少检测时间，增加通过量。例如，文献报道了一种化学发光底物液。该化学发光底物液包括如下组分：150mg/L的APS-5，10mmol/L-500mmol/L的缓冲基质，0.1mg/L-20mg/L的荧光增强物质，10mg/L-5000mg/L的本底发光抑制物质及0.1g/L-10g/L的表面活性剂，化学发光底物液的pH为8-11。该底发光抑制物质为具有弱还原性的无机还原剂或者具有弱还原性的有机还原剂，表面活性剂为非离子表面活性剂与阴离子表面活性剂的混合物或者为非离子表面活性剂与阳离子表面活性剂的混合物。上述化学发光底物液达到发光平台期时间短，发光持续时间长，检测灵敏度高且光稳定性好，可以提高临床免疫检测速度，缩短检测时间[3]。在众多分析研究中，APS-5还具有以下优点，发光强度高，平台期短，3-5S可以达到发光峰值；可以持续稳定发光，其发光过程在25-35℃内不受温度影响，不需温度控制。

反应机理

APS-5用于分析研究的原理主要包括两步：

（1）酶催化作用‌：在碱性磷酸酶的作用下，APS-5分解产生光子。

‌（2）光子检测‌：释放出的光子数量与溶液中碱性磷酸酶的浓度成正比，因此可以用于碱性磷酸酶的定量检测‌。

参考文献

[1]傅智杰,周锦龙,龚海文,等.一种酶促化学发光底物液配制方法以及加注装置:CN202010013245.3[P].CN111077140A.

[2]郭佳.一种用于免疫分析的化学发光试剂APS-5的合成方法:CN202210713643.5[P].CN202210713643.5.

[3]刘挺,邓月月,姚天成.化学发光底物液及其应用:CN201811215406.6[P].CN109490281A.