洋艾素的主要应用

背景及概述^[1-2]

洋艾素为黄酮类物质，臭灵丹草为菊科植物翼齿六凌菊全草，又叫鹿耳林、大黑药，传统医学认为其具有清热解毒、止咳祛痰作用。现有成药灵丹草颗粒、片剂和合剂，用于风热邪毒，咽喉肿痛，肺热咳嗽；急性咽炎、扁桃体炎、上呼吸道感染等症。现代研究发现，臭灵丹草中不仅含有萜类功能性成分，含有黄酮类功能性成分，其中洋艾素就是臭灵丹草中的功能性指标性成分，《药典》2010版规定臭灵丹草中洋艾素含量不得低于0.1%。通过文献检索，从臭灵丹草中提取洋艾素的方法公开甚少，尤其高纯度的洋艾素制备方法。如文献“臭灵丹菇类和黄酮化合物”采用的方法是水煎煮提取，硅胶柱色谱和重结晶等方法进行分离纯化得到包括洋艾素在内的多种化合物。由于采用传统的硅胶柱分离，分离过程溶剂体系选在复杂，梯度洗脱用量大，周期长，而且会分离过程中会产生死吸附现象，造成产品收率低，不适合洋艾素的制备。

应用^[3-4]

洋艾素应用举例如下：

1）制备一种治疗急性呼吸衰竭的药物，所述治疗急性呼吸衰竭的药物，按照重量份的主要原料为：葶苈子25-30份、白豆蔻19-24份、硬飞燕草碱2-6份、8-乙氧基滇乌碱26-34份、广藿香酮25-30份、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷6-12份、木通苯乙醇苷B-5-10份、洋艾素16-20份、女贞苷4-8份、异茴芹素4-8份、檀香醇4-8份。本发明药物根据急性呼吸衰竭的认识机理对原料成分进行严格挑选，从而达到全面康复的目的，具有起效快、作用稳定、携带服用方便、长期服用无毒副作用的特点。

2）制备一种治疗成人蛔虫病的西药，所述治疗成人蛔虫病的西药，按照重量份的主要原料为：雪松醇2-6份、缬沙坦0.5-0.8份、相思豆碱5-9份、异乌药内酯23-30份、3，29-二苯甲酰基栝楼仁三醇8-17份、洋艾素15-25份、麻黄碱8-12份、猪苓酸C-4-6份、白头翁皂苷A-5-10份、利多卡因5-7份。本发明药物根据成人蛔虫病的认识机理对原料成分进行严格挑选，从而达到全面康复的目的，具有起效快、作用稳定、携带服用方便、长期服用无毒副作用的特点。

制备^[1-2]

方法1：一种制备洋艾素的方法，其特征在于：取臭灵丹草粉碎，加入5-15倍量40-90%甲醇溶液超声提取2-3次，提取液减压浓缩至无醇放置沉淀，沉淀物滤出用饱和石灰石水溶解，除去不溶物，再调节中性，过滤，滤出物采用高速逆流色谱分离，紫外检测器检测，收集目标成分，浓缩结晶，干燥得洋艾素。所述的高速逆流色谱分离的溶剂系统可选三元溶剂体系，优选氯仿、甲醇、水，比例为4-10：3-7：2-5，上相为流动相，下相为固定相。所述的高速逆流色谱分离的溶剂系统可选四元溶剂体系，优选石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水，比例为1-10：2-10：2-9：1-9，下相为流动相，上相为固定相。所述的高速逆流色谱分离时主机转速可为700-1000rpm，流动相流速为1-4ml/min。本发明的优势是：采用了超临界CO2梯度萃取，先萃取小分子非极性物质，再通入加夹带剂萃取有效成分，所得粗提物含量高，萃取过程中能耗低、无污染、效率高，而且整个工艺操作简单，易于实现工业化生产。

方法2：一种从臭灵丹草中提取洋艾素的方法，其特征在于以下步骤：：a取臭灵丹草粉碎40-80目，加入超临界萃取釜中，在萃取压力15-30MPa、温度40-50℃的条件下，超临界CO2梯度萃取，解析，得粗提物；b上述粗提物加入聚酰胺树脂干燥，装柱，乙醇溶液梯度洗脱，薄层检测，收集目高浓度流分，浓缩结晶，再采用乙醇溶液溶解重结晶，干燥即得洋艾素。具体步骤为：臭灵丹草药材粉碎80目，取1kg加入超临界萃取釜中，通入液态CO2，设置在萃取压力18MPa、温度50℃，达到上述参数后，调整液态CO2流速为20kg/h，动态萃取2小时，在压力5MPa，温度50℃调件下解析萃取物弃去，再调节压力25MPa，同时通入无水丙酮做夹带剂，流速0.3L/h，萃取2小时，解析萃取物，加入100g聚酰胺树脂混匀干燥，装柱，先取400ml50%乙醇洗脱杂质，再用60%乙醇溶液洗脱，薄层检测，收集高浓度流分，浓缩至约1/3体积结晶，滤出再用80%乙醇回流溶解重结晶，干燥，得洋艾素720mg，经HPLC检测，含量93.4%。

含量测定

洋艾素测定方法如下：采用高效液相色谱仪和二极管阵列(DAD)检测器或者紫外检测器，以C₁₈色谱柱，乙腈-水为流动相，检测波长253-256nm作为色谱条件，用流动相将洋艾素制成2-15μg/ml的对照品溶液，取灵丹草制剂，研细，混匀，精密称取，制成的试品溶液，用微量进样器进样10-20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得灵丹草含片中洋艾素的量。

主要参考资料

[1] CN201110303897.1一种制备洋艾素的方法

[2] CN200510019121.1灵丹草含片及其制备方法和灵丹草含片的质量控制方法

[3] CN201611252806.5一种治疗急性呼吸衰竭的药物

[4] CN201611236265.7一种治疗成人蛔虫病的西药