SDS电泳缓冲液的用途及分类

蛋白电泳缓冲液

蛋白电泳缓冲液的种类非常多，需要根据凝胶体系来进行选择。凝胶系统为 Tris-甘氨酸体系时，可选择 Tris-甘氨酸电泳缓冲液，凝胶系统为 Bis-Tris 体系时，可选择 MES 或 MOPS 缓冲液，当凝胶系统为 Tris-tricine 体系时，则选择 Tricine 缓冲液。

并且，蛋白电泳缓冲液分为变性与非变性缓冲液，区别在于变性缓冲液需加入 SDS （十二烷基硫酸钠）中和电荷。我们通常研究 WB、IP 时，使用变性缓冲液研究分子量大小即可，非变性缓冲液常用于研究蛋白空间结构、等电点等。

上样缓冲液

上样缓冲液(Loading Buffer)是各类实验不可缺少的，可根据实验类型选择不同的 Buffer，可分为DNA 电泳 Loading Buffer、RNA 电泳 Loading Buffer 以及 SDS-PAGE Loading Buffer 。

SDS电泳缓冲液

10×Tris-醋酸-SDS电泳缓冲液

10×Tris-醋酸-SDS电泳缓冲液是可以用于Tris-醋酸系统蛋白凝胶电泳的电泳缓冲液，用于蛋白变性电泳。本溶液为10×浓缩液，使用前稀释成1×即用型缓冲液使用。1×即用型Tris-醋酸-SDS电泳缓冲液组份浓度为：50 mM Tris，50 mM Tricine，0.1% SDS，~pH8.2。对于还原样品电泳，1×即用型电泳缓冲液要添加400×抗氧化剂后使用；非还原样品电泳，不需要添加抗氧化剂。

SDS- PAGE电泳缓冲液

SDS-PAGE，十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳，是一种可以根据蛋白质的分子量分离样本中蛋白质的技术。聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(简称Acr)和交联剂N，N'-亚甲基双丙烯酰胺(简称Bis)在催化剂过硫酸铵(APS)，N，N，N'，N’-四甲基乙二胺(TEMED)作用下，聚合交联形成的具有网状立体结构的凝胶，并以此为支持物进行电泳。

SDS- PAGE电泳缓冲液适用于Tris-甘氨酸系统的变性聚丙烯酰胺凝胶蛋白电泳，为电泳过程提供稳定的电泳及缓冲环境，配合不同浓度的分离胶使用，可实现6-400kDa范围的蛋白分离。本品为改良产品，在成分选择和各组分浓度两方面进行了优化，可提供更加稳定、持久的电泳环境。针对常规非连续变性聚丙烯酰胺凝胶电泳实验可至少回收使用5次或累计电泳时间至少12小时。本品为10倍浓缩储液，使用时需用三级水或一级水进行10倍稀释后使用。

5xTris-Glycine Buffer(SDS- PAGE电泳缓液)的配制

组份浓度：0.125 M Tris，1.25 M Glycine， 0.5% (W/V) SDS；配制量1L

称量15.1 g的Tris，94gGlycine以及5gSDS置于1 L烧杯中。

加入约800ml的去离子水，搅拌溶解。

加去离子水将溶液定容至1 L后，室温保存。

各组分的主要作用：

Tris-HCl——稳定电泳过程中的pH。pH对电泳有着至关重要的影响。

十二烷基硫酸钠（SDS）——能破坏蛋白分子的二、三级结构，使分子去折叠，让所有蛋白质分子均匀地带上负电荷，在施加电压的情况下，所有的蛋白质都向凝胶的正极迁移，仅根据蛋白的分子量大小不同而分离，与蛋白的带电量和结构形状无关。在凝胶中也存在SDS，这是为了确保所有的蛋白质在整个凝胶中保持荷载负电荷。