淀粉酶溶液用于糖原染色
发布日期:2024/10/14 10:39:23
糖原染色是病理学中常规的染色方法之一，McManus在1946年最先使用高碘酸-雪夫（PAS）技术显示黏蛋白，该法常用来显示糖原和其他多糖，但却不能区别黏蛋白和糖原。若要准确鉴别黏液物质(如黏蛋白或糖原)，需加入糖原消化步骤；大多数情况下可用淀粉酶溶液来催化糖原的糖苷键水解，形成水溶性的双糖-麦芽糖，在应用PAS技术之前将糖原从组织切片上除去。
用法
两张相同切片，二甲苯或脱蜡透明液脱蜡，梯度乙醇入水。一张切片入37℃淀粉酶溶液处理1h；另一张不用淀粉酶溶液处理，入水中1h作为对照。流水冲洗两张切片各5～10min。进行糖原PAS染色步骤。
染色结果
糖原、中性唾液黏蛋白：红紫色
各种糖蛋白：红紫色
细胞核：蓝色
未处理的切片，糖原呈亮红色或红紫色；淀粉酶处理的切片，糖原阴性。
注意事项
1. 切片脱蜡应尽量干净，否则影响染色效果。
2. 最好使用一张阳性对照片验证酶的活性。
3. 避免接触过多的阳光和空气，使用前最好提前取出恢复到在室温后，避光暗处使用。
4. 冷冻切片染色时间尽量要短。
5. 淀粉酶溶液开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。
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