PIAS1抗体的应用

背景^[1-3]

PIAS1抗体是一种用于研究PIAS1（蛋白抑制剂激活的STAT1）蛋白的抗体。这种抗体可以用于多种实验应用，如免疫印迹（Western Blot）、免疫沉淀（Immunoprecipitation）、免疫荧光（Immunofluorescence）和酶联免疫吸附试验（ELISA）。不同的PIAS1抗体可能具有不同的特性和应用范围。

SCBT提供的PIAS1抗体（F-1）：这是一种小鼠单克隆IgG3κ抗体，适用于小鼠、大鼠和人的PIAS1的WB、IP、IF和ELISA检测。它对PIAS1蛋白的C-端氨基酸627-651之间的特异性抗原位点有反应。

Abcam提供的PIAS1抗体：这是一种兔多克隆抗体，适用于免疫组化/免疫荧光（ICC/IF）和Western Blot（WB）。它与小鼠、人类和重组片段反应，免疫原是与人PIAS1的500-600氨基酸序列相对应的合成肽。

Abcam提供的PIAS1抗体：这也是一种兔多克隆抗体，适用于WB。它与人类PIAS1反应，免疫原是与人PIAS1内部序列相对应的合成肽。

Thermo Fisher Scientific提供的PIAS1 Polyclonal Antibody(PA5-79819)：这是一种兔多克隆抗体，适用于WB、免疫组化（石蜡）(IHC(P))和免疫细胞化学(ICC/IF)。它对人类、小鼠和大鼠的PIAS1有反应，免疫原是与人PIAS1 C-端636-651氨基酸序列相对应的合成肽。

PIAS1抗体

PIAS1抗体的使用步骤可能会根据具体的实验目的和实验室的标准操作流程有所不同，但以下是一个通用的使用步骤指南：

1.准备材料：

PIAS1抗体（根据实验需求选择适当类型）。

适当的缓冲液和稀释液。

实验所需的试剂和设备，如酶联免疫吸附试验（ELISA）板、移液器、洗液等。

2.抗体稀释：

根据制造商的推荐，将PIAS1抗体稀释到适当的浓度。

通常使用磷酸盐缓冲盐水（PBS）或含有0.1%牛血清白蛋白（BSA）的PBS作为稀释液。

3.样品处理：

如果需要，对样本进行适当的处理，如蛋白提取、稀释等。

确保样本符合实验要求，如pH值、蛋白质浓度等。

4.抗体孵育：

将稀释后的PIAS1抗体加入样本中，按照说明书推荐的孵育时间进行孵育。

孵育温度和条件根据实验方法而定，例如免疫印迹（WB）通常在室温下孵育，而免疫组化（IHC）可能在4°C下孵育过夜。

5.洗涤步骤：

使用适当的洗涤液（如PBS和Tween-20）洗涤样本，去除未结合的抗体。

重复洗涤步骤，通常需要洗涤3-5次。

6.检测：

根据实验方法，进行后续的检测步骤，如加入二抗、显色等。

对于ELISA，可能需要加入底物溶液，然后用酶标仪检测450 nm处的吸光度。

7.数据分析：

根据实验结果，分析PIAS1的表达水平或分布情况。

对照组和实验组的结果应进行比较，以评估实验的可靠性。

应用^[4][5]

PIAS1抗体可以用于STAT1及其抑制因子PIAS1在早期宫颈鳞癌中的表达及意义

检测信号转导子和转录激活子1(signal transducer andactivators of transcription 1,STAT1)及其抑制因子(proteininhibitor of activated STAT1,PIAS1)在正常宫颈组织、宫颈非典型增生组织(CIN)及早期宫颈鳞癌组织中的表达。从而初步探讨JAK/STAT1信号转导途径及其负调节因子PIAS1与生殖道HPV感染及早期宫颈鳞癌发生发展、临床病理间的关系。

方法:使用PIAS1抗体采取免疫组化SABC法检测STAT1及PIAS1在正常宫颈组织30例,CIN组织45例和早期(Ⅰ期及Ⅱ期)宫颈鳞癌组织53例中STAT1及PIAS1的表达情况。

PIAS1抗体结果:1、STAT1在不同宫颈组织中的表达:STAT1在正常宫颈组、CIN组及早期宫颈鳞癌组中均有表达,其免疫组化阳性反应物主要位于胞浆,可见少数胞核着色。正常宫颈组中,PIAS1抗体免疫组化评分,HPV阳性组显著高于HPV阴性组(P＜0.05)。在上述三组中,随宫颈病变病情进展,STAT1染色强度逐渐减弱,阳性细胞率逐渐降低,免疫组化评分逐渐下降,且三组间两两比较差异均有统计学意义(P＜0.01)。在CIN组内PIAS1抗体免疫组化评分,CINⅠ级组较正常宫颈组显著降低(P＜0.05),较CINⅢ级组及早期宫颈鳞癌组显著升高(均P＜0.01),与CINⅡ级组相比虽免疫组化评分高,但差异无明显统计学意义(P＞0.05);CINⅡ级组较正常宫颈组显著降低(P＜0.05),明显高于CINⅢ级组(P＜0.05)及早期宫颈鳞癌组(P＜0.01);CINⅢ级组较正常宫颈组显著降低(P＜0.01),较早期宫颈鳞癌组显著升高(P＜0.01)。在早期宫颈鳞癌组内,STAT1的表达还与肿瘤FIGO分期、病理分级及淋巴结转移情况有关(P＜0.05)。

2. PIAS1在不同宫颈组织中的表达:PIAS1在正常宫颈组、CIN组及早期宫颈鳞癌组中均有表达,其免疫组化法阳性反应物同样主要位于胞浆,可见少数胞核着色。正常宫颈组中,PIAS1抗体免疫组化评分HPV阳性组显著高于HPV阴性组(P＜0.05)。在上述三组中,随宫颈病变病情进展,PIAS1染色强度逐渐增强,阳性细胞率逐渐增高,免疫组化评分逐渐升高,且三组间两两比较差异均有统计学意义(P＜0.01)。在CIN组内PIAS1抗体免疫组化评分,CINⅠ级组较CINⅢ级组(P＜0.05)及早期宫颈鳞癌组(P＜0.01)显著降低,较正常宫颈组升高,较CINⅡ组降低,但差异无明显统计学意义(P＞0.05);CINⅡ级组较早期宫颈鳞癌组显著降低(P＜0.05),较正常宫颈组升高,较CINⅢ级组降低,但差异均无统计学意义(P＞0.05);CINⅢ级组较正常宫颈组显著升高(P＜0.01),较早期宫颈鳞癌组显著降低(P＜0.01)。在早期宫颈鳞癌组中,PIAS1的表达还与肿瘤FIGO分期、病理分级及淋巴结转移情况有关(P＜0.05)。

3.STAT1及PIAS1表达相关性:STAT1及PIAS1在正常宫颈组、CIN组及早期宫颈鳞癌组中的表达呈负相关,相关系数为-0.753,P＜0.01,有统计学意义。

参考文献

[1]Comparative analysis of characteristics of women with cervical cancer in high-versus low-incidence regions[J].Jihong Liu;;Barbara Rose;;Xin Huang;;Gewang Liao;;Jonathan Carter;;Xiaojuan Wu;;Carol Thompson.Gynecologic Oncology,2004(3)

[2]Selective Activation Of Members Of The Signal Transducers And Activators Of Transcription Family In Prostate Carcinoma[J].Zuyao Ni;;Wei Lou;;Soo O.K.Lee;;Rajiv Dhir;;Fernando De Miguel;;Jennifer Rubin Grandis;;Allen C.Gao.The Journal of Urology,2002(4)

[3]The role of STATs in proliferation,differentiation,and apoptosis[J].A.L.-F.Mui.Cellular and Molecular Life Sciences,1999(12)

[4]Physiological significance of STAT proteins:investigations through gene disruption in vivo[J].D.E.Levy.Cellular and Molecular Life Sciences,1999(12)

[5]叶明珠.STAT1及其抑制因子PIAS1在早期宫颈鳞癌中的表达及意义[D].中南大学,2009.