CDE发布抗体偶联药物药学研究与评价技术指导原则——解析ADC PK分析关键点

抗体偶联药物（ADC）以其独特的靶向性和高效性，成为了癌症治疗领域的璀璨明星。2023年9月27日，国家药监局药审中心发布了《抗体偶联药物非临床研究技术指导原则》，为更好指导和促进ADC药物的研究和开发进行了科学的指导，以获取科学规范的试验数据支持开展后续临床试验和批准上市。

PK分析的关键环节

ADC的复杂偶联结构给其药代动力学（PK）分析带来了诸多挑战。在进行PK样品分析时，必须综合考虑ADC的组成、理化特性、体内代谢机制以及检测方法的灵敏度和线性范围。根据CDE的指导原则，ADC的PK研究涉及多个关键环节，包括体外稳定性测试、血药浓度-时间曲线分析、ADME（吸收、分布、代谢、排泄）研究、血浆蛋白结合率评估等。

ADC的疗效和毒性与其抗体偶联药物、游离药物和总抗体的含量紧密相关。因此，在PK研究中，需要测定偶联抗体、总抗体（偶联抗体与裸抗体之和）以及游离小分子化合物的含量。

总抗体和偶联抗体的检测常采用配体结合分析（Ligand Binding Assay，LBA）方法，其中酶联免疫吸附测定（ELISA）为金标准。对于游离和偶联药物及其分解代谢物，通常用液相色谱-质谱法（LC-MS）法来分析。为确保检测的准确性，需开发一系列针对不同表位抗体的检测方法，并以结合产生的新表位阳性抗体作为对照。

为了解决ADC药物PK分析中的挑战和难点，ACROBiosystems百普赛斯发布多种高质量、高亲和力、高稳定性的抗Payload抗体，可用于ADC进临床前及临床阶段的PK检测、DAR值分析以及ADC药物的疗效评估等，为提高ADC药物PK分析的准确性和可靠性提供了有力的支持和保障。

★高纯度：纯度经SDS-PAGE及SEC-MALS验证>95%；

★高灵敏度：经ADC药物结合验证；

★高特异性：可特异性识别小分子毒素；

★方便快捷：HRP标记可节省二抗和标记时间；

★售后完善：提供完善的售后技术支持满足客户的技术指导需求。

PK分析的检测方法

配体结合分析（Ligand Binding Assay，LBA）的方法

在总抗体ELISA测定中，可以用抗独特型抗体(Anti-ID Ab)、抗原(Target)或抗Fc抗体(Anti-human IgG Fc Ab2)作为捕获试剂，辣根过氧化物酶（HRP）标记抗人IgG Fc抗体(HRP-Anti-human IgG Fc Ab1)作为检测试剂，检测ADC药物中总抗体浓度。

在结合型抗体ELISA测定中，用抗Payload抗体(Anti-paylooadAb)包板，捕获样本中的结合型抗体，通过辣根过氧化物酶标记抗人IgG Fc抗体(HRP-Anti-human IgG Fc Ab1)、辣根过氧化物酶标记抗独特型抗体(HRP-Anti-ID Ab)或者生物素标记抗原(Biotinylated Target) 检测ADC药物中结合型抗体浓度。

LC-MS/MS

LC-MS/MS目前主要用于测定游离小分子，因其结合了液相色谱的高分离效能和质谱的高灵敏度和高特异性，使得它能够准确地检测和定量游离小分子药物。

LBA-LC-MS/MS

LBA-LC-MS/MS混合检测技术是 LBA 的补充替代品，该技术通过LBA和LC-MS/MS的互补优势，提高检测的特异性和灵敏度，实现对ADC偶联有效载荷的精确分析。典型的过程如下图：

通过标记的生物分析方法分析ADCs

放射性标记技术为ADC体内药代动力学研究提供了新的视角。通过掺入放射性同位素或荧光报告基因，结合先进的成像技术如正电子发射断层扫描（PET），单光子发射计算机断层扫描（SPECT）和荧光分子断层扫描（FMT），可以实时、无创地监测ADC在体内的动态变化，为药物疗效和安全性评价提供重要依据。

由于ADC的复杂性和异质性及其体内动态变化，其药代动力学特征也相应复杂，这给ADC的生物分析带来了很大的挑战。ADC的生物分析应同时关注完整的ADC、总抗体、释放的小分子细胞毒素和相关代谢物。在这些年中，需要对ADC进行预标记的分析方法（如PET和PMT）和无标记分析方法（如基于LBA和MS的测定）已被广泛用于ADC的药代动力学研究。不同分析技术的结合有助于更好、更透彻地了解ADC的药代动力学行为、结构暴露-安全性/有效性关系，这对ADC的设计和开发具有重要意义。

信息来源

北京百普赛斯生物科技股份有限公司