荧光素的应用与制备

荧光素是一种合成有机化合物，外观为暗橙色/红色粉末，可溶于乙醇，微溶于水。在蓝光或紫外线照射下会发出绿色荧光。在多种技术应用（如荧光抗体技术）中被广泛用作为荧光示踪物。在眼表疾病的临床工作中，也用荧光素钠进行染色，后在蓝光下观察，以评估角膜屏障功能是否受损及受损程度。

应用

荧光素是橙红色化合物，C20H12O5，其在碱性溶液中显示出强荧光并且例如在医学中用于诊断目的，在海洋学中用作示踪剂以及用作纺织染料。

荧光素血管造影术是重要的诊断工具，它允许研究眼后部的血管病症。这些血管是许多涉及视网膜的疾病的因素。血管造影术是通过将荧光素注射入患者手臂的静脉来进行的。在很短的时间内(即典型地从几秒至数秒)，染料通过眼后部的血管，并且当染料在眼血管中循环时，应用配有特别滤光镜的照相机对染料成像。通过检查由此产生的影像，可以得出关于任何循环问题的评价，例如血管渗漏、肿胀、异常或新血管等。 

荧光素吸收蓝光，在465-490nm波长处发生峰吸收和激发。荧光在520-530nm黄绿波长处发生。尽管通常称为荧光素，但是造影术中所用的染料是荧光素钠(可溶的荧光素二钠盐)。

制备方法

制备基本上纯的荧光素的方法，该方法包括：

(a)将商品级荧光素和乙酸酐的混合物在回流下搅拌数小时，并且将产生的悬浮液冷却，进一步冷却至冰点或刚低于产生完全结晶，收集结晶物质并且先用冷的乙酸酐洗涤，然后用冷的丙酮洗涤，然后将物质再悬浮于丙酮中，同时搅拌并且温和加热，冷却后，收集白色结晶物质，用冷的丙酮洗涤并且空气干燥，得到高纯度的O，O’-二乙酰基荧光素；

(b)应用在水中的氢氧化钠水解由商品级荧光素制备的二乙酰基荧光素以形成荧光素；

(c)将反应混合物的pH调节至8.5至8.7之间；

(d)将适合的炭加入至荧光素的溶液中以形成荧光素/炭混合物，然后过滤荧光素/炭混合物以形成滤液；

(e)将乙醇加入至滤液中以获得2∶1比例的乙醇-水；

(f)在冷却下，应用稀释的盐酸溶液调节pH至1.0-2.5的水平，该过程持续2至4小时，以形成沉淀；

(g)过滤溶液以保留沉淀；

(h)用水和乙醇溶液洗涤沉淀，干燥；

其中如果没有检测到有关物质杂质，或者如果检测到单一的有关物质杂质并且其存在的量不大于0.1％重量，或者如果检测到多种有关物质杂质并且其总共存在的量不大于0.6％重量，则产生的荧光素被定义为基本上纯的。

参考文献

CN101605796B