Nestin抗体(小鼠单抗)

背景^[1-7]

Nestin抗体(小鼠单抗)是用人工合成的人nestin羧基端附近包含150个氨基酸的一段多肽作为抗原制备而成的抗nestin小鼠单克隆抗体。克隆号为10c2。Nestin，中文名为巢蛋白，是胚胎中枢神经系统祖细胞(progenitor cell)的主要中间纤维(intermediate filament)蛋白。Nestin在大脑发育过程中高表达，但在大脑发育成熟后表达量会急剧下降，被神经纤维(neurofilament)蛋白所替代。

由于nestin在神经细胞和胶质细胞及它们的前体细胞中都有表达，并且nestin在发育的大脑和受损伤的大脑和脊髓中都有表达，因此nestin被广泛用作神经干细胞(neural stem cells)或神经祖细胞(neural progenitor cells)的分子标记。Nestin在胶质瘤(glioma)，神经母细胞瘤(neuroblastomas)等不同的神经系统肿瘤细胞中被发现，因此nestin也被广泛作为神经肿瘤干细胞(neural cancer stem cells)的分子标记。

由于Nestin在其它类型细胞中也有表达，以nestin作为分子标记进行判定的时候还能同时结合其它指标。Nestin是肌肉发育过程中动态微丝网络的组成部分，可以聚合Desmin和Vimentin。Nestin与Vimentin和α-internexin形成异源复合物，并进一步装配成中间纤维。在快速生长过程中，nestin特异表达在神经上皮干细胞(neuroepithelial stem cells)、胶质瘤(glioma)细胞和肿瘤内皮细胞中。Nestin在神经元轴突生长过程中分布在生长锥(growth cone)，可能和生长锥的导向(guidance)有关。

Nestin是神经干细胞的蛋白质标记物，也在卵泡干细胞及其直接分化后代中表达。毛囊凸起区域是活跃生长的多能成体干细胞的丰富，易于获得的来源。绿色荧光蛋白（GFP），其表达由转基因小鼠中的巢蛋白调节元件驱动，用于标记毛囊干细胞。这些细胞可在体外分化为神经元，神经胶质，角质形成细胞，平滑肌细胞和黑素细胞。因此，毛囊干细胞提供了有效的，可接近的自体干细胞来源，用于治疗周围神经损伤。最近，Nestin作为检测新形成的内皮细胞的标记受到关注。巢蛋白是结肠直肠癌组织中增殖的内皮细胞的血管生成标志物。

应用^[8][9]

Nestin抗体(小鼠单抗)可用于研究癌症的表达与分布特征：

在巢蛋白在喉癌的表达与分布特征研究中探讨巢蛋白在喉鳞癌中的表达及分布状况,检测其表达水平及其与临床分期、TNM分期、分化程度、分型等临床病理参数的关系。方法用免疫组织化学(即用型快捷免疫组化,MaxVisionTM/HRP法,DAB染色)的方法,通过检测巢蛋白及CD31在10例喉鳞癌(LSCC)组织和10例癌旁组织(对照组)中的表达,通过imageJ的免疫组化插件IHCProfiler作组织切片的光密度(OD)定量,并且收集10例喉鳞癌患者详细的临床资料,分析巢蛋白及CD31的表达及与临床病理学特征的关系。

结果在10例喉鳞癌组织及10例癌旁组织中,巢蛋白表达于结缔组织中的血管内皮的细胞质,IHC染色下呈浅至深棕黄色,绝大多数癌细胞未见阳性,血管壁的平滑肌纤维阴性;在癌旁的骨骼肌纤维,可见呈表达的阳性的肌纤维细胞。在喉癌组织部位,癌细胞成团分布在结缔组织中。癌细胞核着色大多较浅,密集分布,细胞核较大,且大小不一,有些癌细胞团中央可见无细胞核的癌珠。

在癌细胞团之间,可见结缔组织,即癌组织的间质,其细胞核着色较深,分布较稀疏,或有炎症细胞浸润,细胞核着色较深,较小或分叶。结果在10例喉鳞癌组织及10例癌旁组织中,巢蛋白表达于结缔组织中的血管内皮的细胞质,IHC染色下呈浅至深棕黄色,绝大多数癌细胞未见阳性,血管壁的平滑肌纤维阴性;在癌旁的骨骼肌纤维,可见呈表达的阳性的肌纤维细胞。

在喉癌组织部位,癌细胞成团分布在结缔组织中。癌细胞核着色大多较浅,密集分布,细胞核较大,且大小不一,有些癌细胞团中央可见无细胞核的癌珠。在癌细胞团之间,可见结缔组织,即癌组织的间质,其细胞核着色较深,分布较稀疏,或有炎症细胞浸润,细胞核着色较深,较小或分叶。

参考文献

[1]Nestin:A biomarker of aggressive uterine cancers[J].Erica R.Hope,Paulette Mhawech-Fauceglia,Tanja Pejovic,Christopher M.Zahn,Guisong Wang,Thomas P.Conrads,G.Larry Maxwell,Chad A.Hamilton,Kathleen M.Darcy,Viqar Syed.Gynecologic Oncology.2015

[2]Nestin expression as an independent indicator of poor prognosis forpatients with anaplastic thyroid cancer[J].Kento Kurata,Naoyoshi Onoda,Satoru Noda,Shinichiro Kashiwagi,Yuka Asano,Hidemi Kawajiri,Tsutomu Takashima,Sayaka Tanaka,Masahiko Ohsawa,Kosei Hirakawa.Oncology Letters.2015(2)

[3]Nestin+kidney resident mesenchymal stem cells for the treatment of acute kidney ischemia injury[J].Mei Hua Jiang,Guilan Li,Junfeng Liu,Longshan Liu,Bingyuan Wu,Weijun Huang,Wen He,Chunhua Deng,Dong Wang,Chunling Li,Bruce T.Lahn,Chenggang Shi,Andy Peng Xiang.Biomaterials.2015

[4]Targeting Self-Renewal in High-Grade Brain Tumors Leads to Loss of Brain Tumor Stem Cells and Prolonged Survival[J].Zhe Zhu,Muhammad Amir Khan,Markus Weiler,Jonas Blaes,Leonie Jestaedt,Madeleine Geibert,Peng Zou,Jan Gronych,Olga Bernhardt,Andrey Korshunov,Verena Bugner,Peter Lichter,Bernhard Radlwimmer,Sabine Heiland,Martin Bendszus,Wolfgang Wick,Hai-Kun Liu.Cell Stem Cell.2014

[5]Nestin is a wide‐spectrum abluminal cell marker of salivary gland tumors[J].Hiroyuki Yanai,Yasuharu Sato,Hitoshi Nagatsuka,Tadashi Yoshino.Pathol Int.2013(10)

[6]Rapid Transition of NESTIN‐Expressing Dividing Cells from PROP 1‐Positive to PIT 1‐Positive Advances Prenatal Pituitary Development[J].S.Yoshida,T.Kato,M.Higuchi,H.Yako,M.Chen,N.Kanno,H.Ueharu,Y.Kato.J Neuroendocrinol.2013(9)

[7]Involvement of intermediate filament nestin in cell growth of small-cell lung cancer[J].Osamu Takakuwa,Ken Maeno,Eiji Kunii,Hiroaki Ozasa,Hisatoshi Hijikata,Takehiro Uemura,Daishi Kasai,Hirotsugu Ohkubo,Mikinori Miyazaki,Tetsuya Oguri,Akio Niimi.Lung Cancer.2013(2)

[8]Fibroblast growth factor-2 up-regulates the expression of nestin through the Ras–Raf–ERK–Sp1 signaling axis in C6 glioma cells[J].Kai-Wei Chang,Yuan-Li Huang,Zong-Ruei Wong,Peng-Han Su,Bu-Miin Huang,Tsai-Kai Ju,Hsi-Yuan Yang.Biochemical and Biophysical Research Communications.2013(4)

[9]伍佳理.巢蛋白在喉癌的表达与分布特征[D].湖南师范大学,2018.