测定血浆中双甘肽的浓度可以用什么方法？
发布日期:2024/5/23 10:47:06
双甘肽(Glycylglycine，Gly-Gly)是一种简单的二肽，由两个甘氨酸分子通过肽键连接而成，是白色固体，通常以粉末形式存在。双甘肽具有氨基基团和羧基基团，因此可以表现出酸碱性。在水中，它可以作为两个氨基酸残基的共轭酸和碱，可以接受或释放质子。虽然双甘肽通常在生物体内不扮演重要的生物学角色，但它在实验室研究中经常被用作模拟肽链的部分结构，以研究蛋白质折叠、酶活性、分子相互作用等生物化学过程。
双甘肽的分析和检测可以用于生物医学研究中，例如在血浆或尿液中检测它的浓度可能与某些代谢性疾病或肾脏功能有关，有助于疾病的诊断和监测。本文将介绍一种检测血浆中双甘肽浓度的方法[1]。
检测步骤
血浆样品处理：取血浆样品，加入内标工作液混合后再加入1％ FA/ACN混合后离心处理；离心处理后取上清液至磷脂去除板，放置于正压萃取装置上施加正压，收集萃取液并转移至EP管，于氮气流下吹干并复溶；
固相萃取：将上述血浆样品处理步骤中复溶后的样品装载于固相萃取柱上进行固相萃取并洗脱，收集洗脱液至EP管，于氮气流下吹干并复溶，然后离心处理，取上清液作为待测样品；
仪器检测：使用LC-MS/MS仪器对上述待测样品进行检测。液相色谱的检测条件为：流动相A为0.1％的FA/H2O，流动相B为ACN，柱温40℃，进样体积为2.00μL，流速为0.3mL/min，梯度洗脱15min；双甘肽保留时间为7.8min。
此方法能够快速、准确地对血浆中双甘肽的浓度进行检测，且能够有效降低血浆基质效应，其双甘肽最低定量限为15.625ng/mL，灵敏度高，专属性强，样品用量及进样量小，适用于大批量样本检测。
参考文献
[1] 一种测定血浆中双甘肽浓度的方法. CN117517541A.
