MI-2(Histone Methyltransferase抑制剂)

背景^[1-6]

MI-2(Histone Methyltransferase抑制剂)是抑制Menin-MLL相互作用的药物，是一种不可逆的MALT1抑制剂IC50为446±28 nM。MALT1是一种蛋白质，在人中由编码MALT1基因。小鼠paracaspase基因的遗传消融和生化研究表明，paracaspase是T和B淋巴细胞活化的关键蛋白。它在转录因子的活化中起重要作用的NF-κB，在生产的白介素-2（IL-2）和在T和B淋巴细胞的增殖的两个可变剪接的转录变体编码不同同种型具有已被描述为这个基因。

此外，paracaspase的作用已经显示在由酵母聚糖受体Dectin-1介导的巨噬细胞和树突细胞中的先天免疫应答中，并且响应于某些G蛋白偶联受体的刺激。序列分析提出paracaspase具有N末端死亡结构域，两个中心免疫球蛋白样结构域参与结合B细胞淋巴瘤10（Bcl10）蛋白和半胱天冬酶样结构域。已证实Paracaspase通过其T淋巴细胞中的半胱天冬酶样结构域具有蛋白水解活性。半胱氨酸464和组氨酸414对于该活性是至关重要的。与metacaspases一样，paracaspase在精氨酸残基后切割底物。

迄今为止，已经描述了几种paracaspase底物。在精氨酸228后切割Bcl10。这去除了C末端的最后五个氨基酸，并且对于T细胞与纤连蛋白的粘附是至关重要的，但对于NF-κB活化和IL-2不是。生产。然而，使用paracaspase蛋白水解活性的基于肽的抑制剂（z-VRPR-fmk），已经显示该活性是维持NF-κB活化和IL-2产生所必需的，表明副痉挛酶可能具有其他底物。

参与T细胞介导的NF-κB活化。A20，一种去泛素化酶，已被证明可被人和小鼠中的副痉挛酶切除。然而，表达不可切割的A20突变体的细胞仍然能够激活NF-κB，但是表达C末端或N末端A20裂解产物的细胞激活更多的NF-κB。与表达野生型A20的细胞相比，表明A20的切割导致其失活。由于已经描述了A20具有NF-κB的抑制剂，这表明在T淋巴细胞中paracaspase介导的A20切割对于适当的NF-κB活化是必需的。

通过靶向paracaspase蛋白水解活性，有可能开发出可用于治疗某些淋巴瘤或自身免疫疾病的新药。menin-MLL抑制剂MI-2非常有效地阻断MLL-AF9和MLL-ENL转导的BMC的增殖，GI50值为约5μM。在R1处对不同疏水基团的评估导致几种化合物的开发，其IC50值在纳摩尔范围内，包括MI-2（IC50=446±28nM）和MI-3（IC50=648±25nM）。

解离常数测量的menin-MLL抑制剂为纳摩尔水平，MI-2的Kd=158nM。MI-2可以进入蛋白质靶标并且非常有效地抑制人类细胞中menin-MLL-AF9的相互作用。此外，MI-2对E2A-HLF转导的BMC（GI50>50μM）的细胞生长仅显示出很小的影响，这可能是由于抑制了menin与野生型MLL的相互作用。用MI-2治疗导致MV4中的GI50值低于10μM;11（携带MLL-AF4;GI50=9.5μM），KOPN-8（MLL-ENL;GI50=7.。2μM）和ML-2（MLL-AF6;GI50=8.7μM），MonoMac6（MLL-AF9;GI50=18μM）

应用^[7][8]

MI-2(Histone Methyltransferase抑制剂)可用于自身免疫性结缔组织疾病(CTD)的治疗和免疫研究：

制备Mi 2抗原,测定自身免疫性结缔组织疾病(CTD)中的抗Mi 2抗体,并初步探讨其临床意义。方法制备兔胸腺丙酮粉,提取粗Mi 2抗原,用离子交换层析法纯化抗原。应用免疫双扩散法检测315份CTD和4 0份正常对照血清中的抗Mi 2抗体。分析抗Mi 2抗体在CTD中的分布,并比较皮肌炎(DM)患者中抗Mi 2抗体阳性组与阴性组的临床特点。

结果自制的Mi 2抗原与标准Mi 2抗血清免疫双扩散出现清晰的沉淀线。经DE5 2离子交换层析,Mi 2抗原在0 1～0 2mmol LNaCl洗脱组分中被检出。抗Mi 2抗体在DM和多发性肌炎中的阳性率分别为2 6 1%(12 4 6)和4 5%(2 4 4)。在其他CTD和正常人均未检测到抗Mi 2抗体。

抗Mi 2抗体对DM的特异性为99 4%。对DM而言,阳性组多以皮肤损害为首发表现,病程中多出现V型或围巾型皮疹;而阴性组常以肌肉症状首发,病程中发热多见,两组间差异有显著性(P<0 0 5)。结论兔胸腺丙酮粉中含有Mi 2抗原成分。抗Mi 2抗体是一种对DM诊断较为特异的自身抗体,该抗体阳性的DM可能是DM中的另一亚型。

参考文献

[1]Strong association of dermatomyositis-specific Mi-2 autoantibodies with a tryptophan at position 9 of the HLA-DRβchain.Meriau R,Dick T,Bartz-Bazzanella P,et al.Arthritis and Rheumatism.1996

[2]The association between Mi-2 antibodies and dermatomyositis.Targoff IN,Reichlin M.Arthritis and Rheumatism.1985

[3]A new approach to the classification of idiopathic inflammatory myopathy:myositis-specific autoantibodies define useful homogeneous patient groups.Love LA,Leff RL,Fraser DD,et al.Medicine.1991

[4]Description of a serological reaction characteristic of polymyositis.Reichlin M,Mattioli M.Clinical Immunology.1976

[5]Dierlamm J,Baens M,Wlodarska I,Stefanova-Ouzounova M,Hernandez JM,Hossfeld DK,De Wolf-Peeters C,Hagemeijer A,Van den Berghe H,Marynen P(June 1999)."The apoptosis inhibitor gene API2 and a novel 18q gene,MLT,are recurrently rearranged in the t(11;18)(q21;q21)associated with mucosa-associated lymphoid tissue lymphomas".Blood.93(11):3601–9.

[6]Hosaka S,Akamatsu T,Nakamura S,Kaneko T,Kitano K,Kiyosawa K,Ota H,Hosaka N,Miyabayashi H,Katsuyama T(July 1999)."Mucosa-associated lymphoid tissue(MALT)lymphoma of the rectum with chromosomal translocation of the t(11;18)(q21;q21)and an additional aberration of trisomy 3".Am J Gastroenterol.94(7):1951–4.

[7]Akagi T,Motegi M,Tamura A,Suzuki R,Hosokawa Y,Suzuki H,Ota H,Nakamura S,Morishima Y,Taniwaki M,Seto M(November 1999)."A novel gene,MALT1 at 18q21,is involved in t(11;18)(q21;q21)found in low-grade B-cell lymphoma of mucosa-associated lymphoid tissue".Oncogene.18(42):5785–94.

[8]张国清,唐福林,吴庆军,甘晓丹,邓学新,史艳萍.Mi-2抗原的制备抗Mi-2抗体的检测及其意义[J].中华风湿病学杂志,2003(02):82-85.