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泛素兔单克隆抗体

发布日期:2020/2/13 10:55:29

背景[1-6]

Ubiquitin Rabbit Monoclonal Antibody(泛素兔单克隆抗体)是用泛素D对兔进行系统免疫再取出脾脏细胞赛选出只分泌单一泛素D蛋白的B淋巴细胞,再将此B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行杂交。最后制得分泌单一泛素D蛋白和无限增值的杂交细胞。泛素是一种保守的多肽单元,在泛素-蛋白酶体途径中起重要作用。泛素存在共价连接到另一种蛋白质,或自由(未锚定)。

当共价结合时,它通过异肽键与靶蛋白缀合,或者作为单体(单泛素),通过遍在蛋白的不同Lys残基连接的聚合物(多聚泛蛋白链)或通过泛素的引发剂Met连接的线性聚合物(线性的)多聚泛蛋白链)。多聚泛素链当与靶蛋白连接时,具有不同的功能,这取决于连接的遍在蛋白的Lys残基:Lys-6连接可能参与DNA修复;Lys-11连接参与ERAD(内质网相关降解)和细胞周期调节;Lys-29连接参与溶酶体降解;Lys-33连接参与激酶修饰;Lys-48连接通过蛋白酶体参与蛋白质降解。

Lys-63-连接参与内吞作用,DNA损伤反应以及导致转录因子NF-κ-B活化的信号传导过程。这种抗体与泛素反应,这是一种多肽先生的多肽。8.5kD。它与生理上存在的遍在蛋白和细胞内蛋白质的缀合物反应。特别识别泛素化的细胞质包涵体。5KD。它与生理上存在的遍在蛋白和细胞内蛋白质的缀合物反应。特别识别泛素化的细胞质包涵体。

5KD。它与生理上存在的遍在蛋白和细胞内蛋白质的缀合物反应。特别识别泛素化的细胞质包涵体。泛素样蛋白质修饰剂,其可以共价连接到靶蛋白上,并随后以NUB1L依赖性方式导致它们被26S蛋白酶体降解。可能是一个生存因素。UBA6激活的共轭能力。促进蛋白酶体亚基β-9型(PSMB9/LMP2)的表达。

通过促进泛素化的I-κ-B-α的TNF-α介导的蛋白酶体降解,调节TNF-α诱导的和LPS介导的先天免疫NF-κ-B中枢介质的活化。TNF-α诱导的肾小管上皮细胞(RTEC)中p65核转位所必需的。可能参与树突细胞(DC)成熟,即未成熟树突细胞分化成启动T细胞反应的完全感受态抗原呈递细胞的过程。

通过缩短有丝分裂期并在细胞周期的前中期阶段损害MAD2L1的动粒定位,在长期体外培养和癌症中介导有丝分裂不分离和染色体不稳定性。当蛋白酶体饱和或受损时,可能参与形成聚集体。以半胱氨酸蛋白酶依赖性方式介导细胞凋亡,尤其是在肾病,如多囊肾病和人类免疫缺陷病毒(HIV)相关性肾病(HIVAN)期间的肾上皮和肾小管细胞。

应用[7][8]

泛素D兔单克隆抗体可用于泛素样蛋白D的调控研究:

在研究泛素样蛋白D调控乳腺癌干细胞对乳腺癌生物学行为影响的研究中用免疫组织化学染色法对乳腺癌组织行UBD染色并分析其表达情况;应用实时荧光定量法检测乳腺癌细胞中UBD在基因水平的表达变化;运用细胞划痕实验、Transwell实验探索UBD对乳腺癌细胞侵袭转移、化疗耐药等恶性生物学行为的影响;行Spheroid成球实验、实时荧光定量检测UBD分子过表达下对乳腺癌细胞干性表型的调控情况。

结果组织学检测发现UBD在乳腺癌组织中高表达,细胞学检测发现UBD促进乳腺癌细胞侵袭转移和化疗耐药性,并促进乳腺癌细胞干性细胞群的富集及自我更新等恶性生物学过程;且UBD过表达促进了乳腺癌细胞干性相关基因CD133、CD90、Nanog、Bmi-1、ABCG2、KLF-4、Oct-4的表达(P<0.05)。

参考文献

[1][1]Bates EE,Ravel O,Dieu MC,Ho S,Guret C,Bridon JM,Ait-Yahia S,Brière F,Caux C,Banchereau J,Lebecque S(Oct 1997)."Identification and analysis of a novel member of the ubiquitin family expressed in dendritic cells and mature B cells".European Journal of Immunology.27(10):2471–7.

[2]Fan W,Cai W,Parimoo S,Schwarz DC,Lennon GG,Weissman SM(Aug 1996)."Identification of seven new human MHC class I region genes around the HLA-F locus".Immunogenetics.44(2):97–103.

[3]"Entrez Gene:UBD ubiquitin D".

[4]Hipp MS,Raasi S,Groettrup M,Schmidtke G(Apr 2004)."NEDD8 ultimate buster-1L interacts with the ubiquitin-like protein FAT10 and accelerates its degradation".The Journal of Biological Chemistry.279(16):16503–10.

[5]Liu YC,Pan J,Zhang C,Fan W,Collinge M,Bender JR,Weissman SM(Apr 1999)."A MHC-encoded ubiquitin-like protein(FAT10)binds noncovalently to the spindle assembly checkpoint protein MAD2".Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America.96(8):4313–8.

[6] 韩涛,童雅兰,刘军灵,张双鹤,郭放,刘兆喆,谢晓冬.泛素样蛋白D调控乳腺癌干细胞对乳腺癌生物学行为的影响[J].临床误诊误治,2016,29(04):105-109.

[7] mTOR Complex 2 Regulates Proper Turnover of Insulin Receptor Substrate-1 via the Ubiquitin Ligase Subunit Fbw8[J].Sung Jin Kim,Michael A.DeStefano,Won Jun Oh,Chang-chih Wu,Nicole M.Vega-Cotto,Monica Finlan,Dou Liu,Bing Su,Estela Jacinto.Molecular Cell.2012(6)

[8] 姚威,孙海伟,霍娜,于婉琪,萧飒,陈鸿军.类泛素化蛋白NEDD8单克隆抗体制备[J/OL].中国动物传染病学报:1-8[2019-04-13].

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