SDHA抗体的应用

背景^[1-3]

SDHA抗体是一个非偶联、分子量约73 kDa的兔源、抗SDHA单克隆抗体。它可以用于人、小鼠背景下的多种实验，如Western Blotting（WB）、免疫细胞化学（ICC/IF）、免疫组织化学（IHC-P）和流式细胞术（FC）等，并且该抗体不带标记。

SDHA又称FP|SDH2|SDHF，其基因全名为succinate dehydrogenase complex,subunit A,flavoprotein(Fp)。该抗体可以用于检测和分析SDHA蛋白在细胞和组织中的表达情况，以及与其他蛋白的相互作用。

在使用SDHA抗体进行实验时，需要遵循标准的实验步骤，并注意抗体的保存条件，如建议在收到抗体后将其置于-20度保存，分装以避免反复冻融。此外，抗体的稀释比例也是需要注意的，如在Western Blotting实验中，推荐的稀释比为1:500～1:1,000。

SDHA抗体

SDHA单克隆抗体的应用范围主要包括以下几个方面：

科学研究：SDHA单克隆抗体在生物医学研究中扮演着重要角色。它可以用于检测和分析SDHA蛋白在细胞和组织中的表达情况，以及与其他蛋白的相互作用。这对于理解SDHA蛋白在生物体内的功能和调控机制具有重要意义。

疾病诊断：虽然SDHA单克隆抗体并不直接用于疾病的诊断，但通过对SDHA蛋白表达的研究，可以为某些疾病的诊断提供线索。例如，SDHA是线粒体呼吸链复合体II（琥珀酸脱氢酶）的一个亚基，其异常表达可能与某些线粒体疾病或代谢性疾病有关。

药物研发：SDHA单克隆抗体也可以用于药物研发的过程中。通过研究SDHA蛋白与药物的相互作用，可以了解药物的作用机制和效果，为药物的筛选和优化提供依据。

DHA单克隆抗体的具体应用范围可能因实验条件和实验目的的不同而有所差异。因此，在使用SDHA单克隆抗体进行实验时，需要根据具体情况选择合适的实验方法和条件，并遵循相关的实验规范和安全操作规程。

应用^[4][5]

SDHA抗体可以用于三羧酸循环酶复合物的鉴定及其在原发性扩张型心肌病中的作用机制研究

FH与SDHA抗体制备为了研究三羧酸循环的蛋白复合物的结构,我们通过体外构建,原核克隆表达,蛋白纯化等分子生物学技术,表达和纯化了人源FH和琥珀酸脱氢酶黄素蛋白亚基(succinate dehydrogenase complex,subunit A,flavoprotein variant,SDHA)的抗原,并制备了相应的抗体,用于免疫共沉淀和质谱实验。体外构建了pMAL-c5x/FH,pMAL-c5x/SDHA载体,经转化至大肠杆菌DE3感受态细胞中,表达并纯化了FH和SDHA抗原,通过免疫动物(小鼠和兔)获得抗血清,经IgG纯化获得SDHA抗体,通过免疫共沉淀,免疫印迹,免疫荧光等实验以检测抗体的功能,结果表明制备的FH和SDHA抗体具有免疫共沉淀,免疫印迹,免疫荧光等性能,且这两种人源蛋白制备的抗体能与多个物种的相应蛋白交叉反应,如人,大鼠,小鼠,猪。

三羧酸循环复合物的研究利用制备的FH和SDHA抗体,及AC02,IDH2,MDH2,CS,DLST,SDHB等抗体探索三羧酸循环酶复合物的组成和八种酶的蛋白相互作用,以及电子传递链NDUFS1,ATP5B,氨基酸代谢GOT2,脂肪酸氧化ACAA2和糖分解GAPDH这些酶的蛋白相互作用。利用IP-MS技术研究三羧酸循环酶以及与它密切相关的电子传递链,脂肪酸氧化,氨基酸代谢和糖分解酶的蛋白相互作用,采用western blot验证相互作用,蛋白质凝胶过滤实验探索三羧酸循环蛋白复合物的大小及酶的分布,并利用生物信息学技术构建蛋白相互作用网络。结果表明三羧酸循环酶互相作用,彼此偶联,共同形成大的分子复合物,且以ACO2-IDH2-MDH2-CS为核心蛋白复合物。蛋白质凝胶过滤实验也证实这四种酶在体内形成复合物,NDUFS1,ATP5B,ACAA2,和GAPDH的IP-MS实验也证实它们与三羧酸循环酶形成复合物。

参考文献

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