五氟苯酚生物素酯的制备及应用

背景及概述

五氟苯酚生物素酯又称为d-生物素-O-PFP，是一种胺反应生物素衍生物，可与抗生物素或链霉亲和素高亲和力结合。五氟苯酚酯在pH 7-9与胺基反应形成稳定的酰胺键。与其他胺反应性官能团相比，五氟苯酚生物素酯具有更高的反应性，但在水溶液中具有更好的稳定性。五氟苯酚生物素酯不仅与伯胺基团反应，还与仲胺反应。

溶解性

五氟苯酚生物素酯溶于大部分有机溶剂，如：DCM、DMF、DMSO、THF等等，在水中有很好的溶解性。

处理和使用

五氟苯酚生物素酯取用时候需要注意温差，空气湿度，防止吸潮。在反应中尽可能地处于惰性气体保护中。

制备

生物素与抗生物素蛋白（或链霉抗生物素蛋白）缀合物之间的特异性结合亲和力提供了将荧光染料，酶或EM标记物附着到生物分子上的特异性，五氟苯酚生物素酯为生物素化学修饰产物，通过五氟苯酚和D-生物素合成五氟苯酚生物素酯，收率约98%；通过三氟乙酸五氟苯酯和D-生物素合成五氟苯酚生物素酯，收率约95%[1]。

图1 五氟苯酚生物素酯合成反应式

五氟苯酚生物素酯合成

将1mmold-生物素，0.1mmol的N,N-二异丙基乙基胺，0.1mmol的1-羟基苯并三唑，1.2mmol苯酚溶于10ml二甲基甲酰胺中。向混合物中加入1.1mmolN,N'-二环己基碳二亚胺。在室温下反应进行反应24小时，同时摇动。滤出混合物中出现的白色晶体。向溶液中加入10ml二氯甲烷以沉淀五氟苯酚生物素酯。用二氯甲烷洗涤沉淀物，并从甲醇：乙酸乙酯溶液中结晶。五氟苯酚生物素酯的产率为53％，熔点172-174℃，MW为410gr/mol。

应用

五氟苯酚生物素酯是一种 PROTAC linker,属于 alkyl/ether 类。可用于合成 PROTAC 分子。应用于医学研究，药物释放，纳米技术和新材料研究，细胞培养，以及配体研究，多肽合成支持，接枝高分子化合物，新材料和聚乙二醇改性功能涂层等活性化合物方面。

参考文献

[1] Korshun, Vladimir A.; Pestov, Nikolai B.; Nozhevnikova, Elena V.; Prokhorenko, Igor A.; Gontarev, Sergei V.; Berlin, Yuri A.Synthetic Communications, 1996 , vol. 26, # 13 p. 2531 - 2547