高效液相色谱法定量测定化妆品中聚氨丙基双胍

背景技术

聚氨丙基双胍(polyaminopropyl biguanide,PAPB)是一种双胍类阳离子表面活性剂，是我国《化妆品安全技术规范》（2015年版）中准用的一种防腐剂，规定该物质在化妆品中使用时的最大允许使用量为0.3%。欧盟化妆品法规（EC）第1223/2009号附件V中规定：在化妆品中作为防腐剂最大允许使用量为0.3%；日本《化妆品基准》中规定该物质作为化妆品中的防腐剂使用，最大允许使用量为0.1%。2014年6月18日，欧盟委员会消费者安全科学委员会（SCCS）通过了一项意见，该意见认为：根据现有的数据，聚氨丙基双胍作为防腐剂用于所有化妆品中最大允许使用量为0.3%时，对消费者是不安全的。意见还指出，为确保安全可以使用更低的使用量或限制化妆品的类别，并且需要对其他有代表性的化妆品配方进行皮肤吸收研究。2017年4月7日，SCCS通过了一项新的意见，根据所提供的数据，PAPB作为防腐剂在化妆品中的最大允许使用量最高不超过0.1%是安全的，但不建议在可喷雾配方中使用。

聚氨丙基双胍具有强效广谱杀菌活性，广泛应用于疾病预防控制行业、健康卫生行业，尤其对较难处理的革兰氏阳性、阴性细菌都有较强的抑制作用，对蜜橘蒂腐病有很好的作用效果。关于聚氨丙基双胍的防腐效果、细胞毒性和化学鉴别方法，Rembe等做了详尽的说明，该文献运用的飞行时间质谱（TOF）技术对聚氨丙基双胍进行化学鉴别，仅是定性研究；目前有2篇文献关于普通高效液相法的报道，研究的基质均为隐形眼镜护理液，化妆品基质类型更为复杂，原料中杂质繁多；关于化妆品中聚氨丙基双胍定量检测方法目前尚鲜有文献报道。

检测方法

1、标准储备溶液的制备

准确称取PAPB标准品500mg，精确至0.0001g，置于20mL容量瓶中，用混合提取溶剂溶解并定容至刻度，充分混匀，制得浓度为25mg/mL的标准储备溶液。

2、样品前处理方法

准确称取样品1.0g，精确至0.001g，置于具塞比色管中，加入提取溶剂8mL(涡旋振荡30s，使试样与提取溶剂充分混匀，超声提取20min（工作频率20~43kHz,200W)，用提取溶剂定容至10mL，摇匀，再加入2mL正己烷，涡旋30s，以10000r/min离心5min(离心半径为10cm)，弃去上层的正己烷层，取下层溶液经0.22um的微孔滤膜过滤，取续滤液作为试样溶液备用。如样品含量超出标准曲线范围，则适当增加样品混合提取溶剂的体积来稀释样品。

3、液相色谱条件

色谱柱：Agilent Zorbax SB-C18柱（5um,4.6mm×250mm）；流动相：0.02mol/L乙酸铵（pH=4.8）：甲醇（60：40）等度洗脱。流速1mL/min；柱温：30℃；检测波长：236nm；进样量：20μL。

参考文献

[1]陈静,简龙海,毛北萍等.高效液相色谱法定量测定化妆品中聚氨丙基双胍[J].上海预防医学,2021,33(04):349-354.DOI:10.19428/j.cnki.sjpm.2021.20220.