溶剂红49的检测方法

背景技术

着色剂俗称色素，是食品添加剂的一种，按照着色剂的来源，可分为天然色素和合成色素两大类。我国食品安全国家标准GB2760-2014《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》中明确规定了其在食品中允许添加的范围和用量。溶剂红49(又名罗丹明B)是一种人工合成的碱性染料，一般常用于实验室中细胞荧光染色剂、有色玻璃、特色烟花爆竹等行业。

溶剂红49会导致老鼠皮下组织产生肉瘤，半数致死量为(大鼠，经口)500mg/kg。根据国际癌症研究署（IARC）化学品致癌风险评价表明，摄取、吸入及皮肤接触该物质均会造成急性和慢性的中毒伤害。美国也曾对该物质的危害进行研究，显示其具有致癌性，欧洲食品安全局（EFSA）证实了溶剂红49的致癌性。我国、日本、欧美等国家和地区都相继禁止使用该物质。一些不良商人为了降低成本，获取更加高额利润，将溶剂红49用于腊肠、调味品等食品的染色，消费者如果长期食用会导致身体健康的损害。因此，2008年卫生部发布《食品中可能违法添加的非食用物质名单(第一批）》，明确规定溶剂红49禁止在食品中添加。目前，溶剂红49的检测方法主要分为高效液相色谱法、高效液相色谱串联质谱法等仪器方法和免疫类方法。

检测方法

1、分光光度法

溶剂红49的醇溶液为红色荧光，最大吸收波长554nm，最大荧光波长610nm，激光峰值波长610nm，调谐范围578～610nm。李绪婷等研究了以乙醇作为分散剂、二氯甲烷作为萃取剂萃取食物中溶剂红49的适宜条件，创建了分散液-液微萃取分光光度法测定食品中的溶剂红49。

2、高效液相色谱法

高效液相-紫外法较简单、快速。孙磊龙等通过甲醇正己烷提取辣椒油中的溶剂红49，经过C13固相萃取柱净化，再用高效液相色谱紫外检测器检测。溶液在550nm波长有最大吸收，方法在0.1~10mg·L^-1范围内线性良好，相关系数>0.9994。与高效液相-紫外法相比，高效液相-荧光法的灵敏度更高，选择性也更好。王传现等通过用磷酸乙腈水溶液提取样品中的溶剂红49，经C13固相萃取柱浓缩净化，再用高效液相色谱荧光检测，色谱柱采用C13色谱柱，流动相为水和甲醇，激发波长550nm，发射波长580nm为色谱条件，创建了通过用固相萃取富集净化高效液相色谱荧光检测器测定食品溶剂红49。林长虹等用甲醇水溶液提取，再用超高效液相色谱荧光检测器测定辣椒及其制品中溶剂红49残留量。

3、薄层色谱检测法

薄层色谱法主要包括固定相、流动相两个部分，利用各组分对吸附剂的吸附能力不同进行分离、鉴定的一种技术。夏立娅等使用乙醇氨溶液提取，采用高效硅胶G色谱板作为固定相，正丁醇：无水乙醇：1%氨水（6：2：2）作为流动相，在波长520nm进行扫描，创建辣椒粉中溶剂红49的薄层色谱检测技术。溶剂红49的最低检出量可达到0.01μg。

参考文献

[1]孔繁迪,庞明利,施裔阳,等. 食品中罗丹明B的检测方法[J]. 现代食品,2020,1(2):221-223. DOI:10.16736/j.cnki.cn41-1434/ts.2020.02.073.