胰蛋白酶溶液的应用

背景^[1-3]

胰蛋白酶溶液是一种常用的实验试剂，主要成分是胰蛋白酶，通常用于消化细胞膜，使细胞内的蛋白质水解成可溶性的氨基酸。

胰蛋白酶溶液的配制方法有多种，其中一种常用的方法是将胰蛋白酶粉末溶解在适量的去离子水中，然后加入适量的NaHCO3和Na2CO3，搅拌均匀后过滤除去不溶物即可。

胰蛋白酶溶液

胰蛋白酶溶液的浓度通常以每毫升溶液中所含胰蛋白酶的毫克数来表示，常用的浓度为0.25%或0.02%。

胰蛋白酶溶液是一种由胰腺分泌的消化酶，主要作用是分解蛋白质。它通常用于医疗和实验室领域，如：

消化蛋白质：胰蛋白酶溶液可以用于消化蛋白质，以便进一步分析或检测。

治疗消化不良：胰蛋白酶溶液可以用于治疗消化不良、胃肠道疾病等。

制备药物：胰蛋白酶溶液可以用于制备某些药物，如胰岛素等。

实验室研究：胰蛋白酶溶液在实验室中常用于蛋白质水解反应等研究。

在使用胰蛋白酶溶液时，需要注意以下几点：

胰蛋白酶溶液具有强烈的消化作用，因此需要避免与皮肤或眼睛接触，如果不慎接触，应立即用大量清水冲洗。

胰蛋白酶溶液容易失活，因此应存放在低温、干燥、阴凉处，并避免阳光直射和接触空气。

在使用胰蛋白酶溶液时，应先将其配制成所需浓度，并加入适量的抗微生物剂或防腐剂，以防止微生物污染。

胰蛋白酶溶液对于细胞和组织的消化作用与温度、pH值和作用时间等因素有关，因此在使用时应根据具体情况进行调整。

在配制胰蛋白酶溶液时，应选择适量的缓冲液和控制好pH值，以保证胰蛋白酶的活性。

应用^[4-5]

胰蛋白酶溶液可以用于南极大磷虾胰蛋白酶分离纯化及其促进创伤修复作用研究

从南极大磷虾体内提取胰蛋白酶溶液。通过采用20-70%硫酸铵分级沉淀、DEAE Sepharose Fast Flow离子交换层析、Sephacryl S100凝胶过滤层析，然后将样品进行SDS-PAGE，发现纯化得到一种分子量为32.0KDa的胰蛋白酶组分，作为动物实验中所用的纯化酶。采用全层皮肤缺损法建立新西兰大白兔创伤模型，在兔背后造4个约2cm×2cm方形创面，将创面分为粗酶组、纯化胰蛋白酶溶液组、木瓜蛋白酶组和生理盐水组四组，每天给药两次，每次0.5mL，直至伤口愈合。连续观察创面形态学变化，评价创伤表面瘢痕、测量伤口表面积、观察创伤组织切片、测定皮肤羟脯氨酸含量比较各组创伤愈合效果。

结果显示，相比于木瓜蛋白酶，从南极大磷虾中提取的粗酶和纯化的胰蛋白酶溶液具有良好的促进愈合效果，尤其是粗酶，能明显促进动物创面的愈合，并明显缩短创面愈合时间，还能显著提高在创伤15天羟脯氨酸含量。初步表明南极磷虾胰蛋白酶有增加胶原沉积，增加蛋白质合成，加速上皮组织再生，促进肉芽组织形成等作用。EGF及bFGF是影响创伤修复的两种比较关键的生长因子。

测定表皮生长因子（EGF）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）含量。建模后第十天、十五天，粗酶组和纯化胰蛋白酶溶液组EGFR、bFGF的表达水平较高，相较于木瓜蛋白酶组和生理盐水组差异显著，且粗酶组EGFR、bFGF的表达速度最快（10天左右达到最高峰），因而认为粗酶可能通过调节EGFR、bFGF的表达来发挥其促创伤修复作用。

胰蛋白酶溶液促进创伤修复的作用机制可能有两个方面：第一是粗酶溶液含有多种其它活性物质，如多糖、蛋白等，而甲壳素已经被证实有促进伤口愈合的作用，可能是粗酶中的胰蛋白酶和甲壳素等多糖起协同作用，共同促进了创面的修复，因此粗酶修复效果最佳；第二是胰蛋白酶溶液可能在创伤修复过程中能诱导刺激生长因子的释放，从而加速修复过程，提高修复质量。

参考文献

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[5]张鹏.南极大磷虾胰蛋白酶分离纯化及其促进创伤修复作用研究[D].中国海洋大学,2013.