人鼻咽癌细胞的应用

背景^[1-3]

人鼻咽癌细胞是一种来源于人类鼻咽癌组织的恶性细胞。这些细胞在实验室条件下可以进行培养和研究，以深入了解鼻咽癌的生物学特性、发生机制以及潜在的治疗方法。

人鼻咽癌细胞的研究对于理解鼻咽癌的发病机理、预防和治疗策略的制定具有重要意义。通过对这些细胞的研究，科学家们可以探索鼻咽癌细胞的生长、增殖、转移和耐药性等特性，以及寻找新的治疗靶点和药物。

在实验室中，人鼻咽癌细胞通常通过细胞培养技术进行培养和繁殖。科学家们使用特定的培养基和条件，模拟体内的环境，以促进细胞的生长和增殖。通过这些细胞培养实验，可以观察细胞的形态、生长速度、对药物的敏感性等指标，以评估鼻咽癌的生物学特性和治疗效果。

人鼻咽癌细胞

人鼻咽癌细胞培养操作：

1)复苏人鼻咽癌细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。

将含有1 mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2)人鼻咽癌细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，弃去消化液，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

c、按6-8 mL/瓶补加培养基，轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心4 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。

d、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。

3)人鼻咽癌细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；

a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。

c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

应用^[4-5]

人鼻咽癌细胞可以用于芦荟大黄素对人鼻咽癌细胞CNE2增殖、凋亡及周期的影响

将不同浓度的芦荟大黄素(aloe-emodin,AE)作用于人鼻咽癌细胞CNE2,通过MTT法、流式细胞术检测芦荟大黄素对人鼻咽癌细胞CNE2增殖、凋亡及周期分布的影响,为芦荟大黄素的临床应用提供实验依据。

方法:通过MTT法(又称MTT比色法)和流式细胞术等体外实验观察不同浓度芦荟大黄素对人鼻咽癌细胞CNE2增殖、凋亡及周期分布的影响。

(1) MTT法:将不同浓度的芦荟大黄素(0ug/ml,2.5ug/ml,5ug/ml,10ug/ml,20ug/ml,40ug/ml)作用于人鼻咽癌细胞CNE2,分别培养24h,48h,72h,观察芦荟大黄素对人鼻咽癌细胞CNE2增殖的影响。

(2) 流式细胞术:将不同浓度的芦荟大黄素(0ug/ml,2.5ug/ml,5ug/ml,10ug/ml,20ug/ml,40ug/ml)作用于人鼻咽癌细胞CNE2 48h,观察芦荟大黄素对人鼻咽癌细胞CNE2凋亡和周期分布的影响。

结果:(1)MTT法:不同浓度的芦荟大黄素(0ug/ml,2.5ug/ml,5ug/ml,10ug/ml,20ug/ml,40ug/ml)作用于人鼻咽癌细胞CNE2 24h,48h,72h后,细胞增殖抑制率随着药物浓度和作用时间的增加也相应增加,并在40ug/ml时达到平台期,各实验组与空白组相比P<0.05,具有显著统计学意义。结果表明:芦荟大黄素在(2.5ug/ml40ug/ml)时能抑制人鼻咽癌细胞CNE2的增殖,并呈时间和浓度依赖性。

(2)流式细胞术检测细胞凋亡:将不同浓度的芦荟大黄素(0ug/ml,2.5ug/ml,5ug/ml,10ug/ml,20ug/ml,40ug/ml)作用于人鼻咽癌细胞CNE2 48h,实验结果显示:随着药物浓度的增加,凋亡率从1.153%依次增加至3.753%,与空白组相比P<0.05,具有显著统计学意义。表明芦荟大黄素作用48h时,人鼻咽癌细胞CNE2凋亡率明显增加,并呈浓度依赖性。

(3)流式细胞术检测细胞周期:将不同浓度的芦荟大黄素(0ug/ml,2.5ug/ml,5ug/ml,10ug/ml,20ug/ml,40ug/ml)作用于人鼻咽癌细胞CNE2 48h,实验结果显示:在G2/M期,与AE0ug/ml组相比,其余各组G2/M期细胞比例均明显增加。表明芦荟大黄素作用48h时,能将人鼻咽癌细胞CNE2周期阻滞在G2/M期。

结论:1.芦荟大黄素能抑制人鼻咽癌细胞CNE2的增殖,并呈时间和浓度依懒性。

2. 芦荟大黄素作用48h时,人鼻咽癌细胞CNE2的凋亡率从整体上看凋亡基数不高,但是仍具有依次增加的趋势,尤其是早期凋亡率具有显著的浓度依赖性。

3.芦荟大黄素作用48h时,能将人鼻咽癌细胞CNE2周期阻滞在G2/M期。

参考文献

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