磺胺二甲基嘧啶的药理作用

背景及概述^[1,2]

磺胺类药物是一种广谱抗菌药，临床上主要用于预防和治疗感染性疾病，其中磺胺二甲基嘧啶(SM2)因其性质稳定，制造不需粮食做原料产量大品种多价格低使用简便供应充足等优点，在兽医临床和畜牧养殖业中作为饲料添加剂或动物疾病治疗药物广泛应用长期使用极易在动物体内蓄积，致使抗生素残留这类药物显著的毒副作用也引起了人们的广泛关注。例如：影响泌尿系统功能，引起结晶尿血尿等反应及致癌性磺胺类药物吸收后分布于全身各组织中，以血肝肾含量最高且与血浆蛋白结合率高，所以在体内维持时间长还能透入脑膜积液和其他积液，以及通过胎盘进入胎循环，对孕妇及婴儿极其不利，还易在尿中析出结晶，导致结石而损害肾脏因此欧盟和美国等大多数国家规定食品和饲料中磺胺类药物总量不得超过0.1mg/kg。

药理作用^[1]

磺胺二甲基嘧啶(SM2)是小分子药物，属于典型的半抗原，它本身不能诱导生物体产生抗体，必须将其与蛋白质等大分子载体偶联，形成人工合成的完全抗原，进而制备相应的抗体这也是建立免疫分析过程的前提和关键所在本实验分别采用重氮化(直接连接)戊二醛法(引入间隔臂)将SMT偶联到牛血清白蛋白(BSA)上，用合成的完全抗原免疫小鼠，免疫周期结束后眼眶取血，用酶联免疫分析法测定血清效价，比较两种不同方法合成的完全抗原的免疫效果为下一步的SM2单克隆抗体的制备和SM2残留检测奠定了基础。

合成路线^[3]

磺胺二甲基嘧啶(SM2) (sulfamearizne)是常用磺胺类药物之一,它的合成方法很多,最常用的也是我国工业上所采用的方法,是以磺胺眯与丁酮缩酸以甲醇钠为缩合剂而制得:

丁酮缩醛是以丙酮,甲酸甲醋为原料,以金属钠为缩合剂,在二甲苯中首先制得甲酸丙酮钠,再与甲醇在氯磺酸存在下脱水而得缩醛。

水产品中磺胺二甲基嘧啶的测定^[4]

磺胺二甲基嘧啶是畜牧生产中应用最广泛的磺胺类药物,广泛用于畜禽疾病的治疗和预防. 但过量食用含磺胺二甲基嘧啶的动物组织能导致人的机体发生过敏反应,破坏机体正常菌群生态平衡,导致致病菌产生耐药性. 因此欧美和日本都对动物食品中的磺胺类药物总量作了规定。

1.样品前处理方法  磺胺二甲基嘧啶不溶于水,易溶于稀酸和乙酸乙酯,不溶于正己烷.关于肌肉组织中磺胺二甲嘧啶的提取方法,已有的报道大多用二氯甲烷、乙酸乙酯或偏磷酸一甲醇(体积分数为2∶1)作提取溶剂.用二氯甲烷提取时,组织漂浮在提取溶剂表面,倾倒困难;使用偏磷酸一甲醇作提取溶剂时,由于溶液含有大量的水分,造成减压蒸馏耗时费力;使用乙酸乙酯提取效率最高,但提取的组织内源性物质也最多,净化较困难,净化方法还需要进一步研究.采用乙腈作提取溶剂,提取效率较低,但增加提取溶剂的量,可获得满意的回收率,另外用乙腈提取时共提的杂质也较少.经过反复试验,用25mL乙腈,提取2次,可将目标分析物提取出来. 盐析会促进溶质的析出,可提高有机溶剂提取效果.本试验在提取溶剂中加入无水硫酸钠,除了能够吸收样品中的水分,起到除水的作用,还能提高磺胺二甲基嘧啶提取效率.当无水硫酸钠添加至4.0g时,回收率不再增加.因此,选用添加无水硫酸钠的量为4.0g. 正己烷的作用主要是起到去除乙腈提取磺胺二甲基嘧啶时含有的脂肪等油类杂质.

2.流动相的选择  分别用乙腈-水、甲醇-水、乙腈-水-冰乙酸3种流动相对阴性生物样品和磺胺二甲基嘧啶标准溶液进行分离试验发现,以乙腈-水-冰乙酸做流动相.对乙腈、水、冰乙酸的配比做了进一步考察表明,当流动相乙腈、水、冰乙酸的体积比为20∶80∶0.5时,磺胺二甲基嘧啶峰形对称,灵敏度高,重现性好,且与生物的本底有良好分离,无干扰.

3.线性关系、检测限和回收率  用流动相配制0.02～0.2μg/mL磺胺二甲基嘧啶标准溶液进行分析,以磺胺二甲基嘧啶的峰面积y为纵坐标,磺胺二甲基嘧啶的质量浓度x(μg/mL)为横坐标进行线性回归分析(回归方程为y=118.4088x-0.1190,相关系数为0.9981).分别在鲫鱼、鳗鱼、罗非鱼、南美白对虾等样品中以30μg/kg的水平添加磺胺二甲基嘧啶,按本文中的方法对样品进行处理和分析,得到的回收率和相对标准偏差(RSD)如表1所示.该方法的检测限(S/N=3)为5μg/kg。

参考文献

[1]   栗世婷．磺胺二甲基嘧啶完全抗原的合成和鉴定[J]．药物生物技术，2017，24（04）：294-298．

[2]   张伟，钟理，许若丹，等．磺胺二甲基嘧啶人工抗原合成及多克隆抗体制备[J]．河北农业大学学报，2005（06）：76-80．

[3]   陈启槐，奚绍祁．磺胺甲基嘧啶合成新法[J]．药学学报，1966（01）：59-60．

[4]   张振霖．水产品中磺胺二甲基嘧啶残留量的高效液相色谱法测定[J]．重庆工学院学报(自然科学版)，2009，23（03）：76-78．