测定中药材中马兜铃酸含量的方法

背景

马兜铃酸类化合物是一类硝基菲羧酸，这类化合物天然存在于诸如马兜铃属(Aristolochia)及细辛属(Asarum)等马兜铃科植物中，其中诸如广防己、青木香、天仙藤、马兜铃、寻骨风、朱砂莲等药材仍然被列入2015年版中国药典中，早期发现马兜铃酸类化合物具有抗癌和抗感染等活性，可用于支气管炎、扁桃体炎、肾炎、前列腺炎等感染性疾病，但现在马兜铃酸类成分已经被确认为有明确的肾毒性、致癌、致畸作用，用药不当会产生强烈的毒性反应，危急病人生命健康。因此，这些中药材中马兜铃酸类物质的质量控制研究可以为毒理学研究和保证临床用药安全提供科学的指导依据。

测定方法

专利 CN106324128A 提出了一种中药材中马兜铃酸类化合物含量测定方法，包括以下步骤：

(1)供试品溶液制备：称取中药材，加入提取溶剂提取，离心，取上清液进行过滤，得供试品溶液；

其中所述提取溶剂为甲醇；每0.2g的中药材中加入提取溶剂3.0～5.0ml提取溶剂；加入提取溶剂提取时进行超声；所述离心的速度是3000～5000rpm；所述过滤采用微孔滤膜。

(2)对照品溶液制备：分别精密称取标准品适量，加入DMF溶解，然后再加入甲醇配置成标准品溶液，作为对照品溶液。

(3)测定：采用HPLC分别对供试品溶液和对照品溶液进行定性或定量检测。

其中，定性方法：采用HPLC在相同色谱条件下分别测定供试品溶液和对照品溶液，将获得的供试品溶液的色谱图，与对照品溶液的色谱图进行比较，根据相对保留时间和特征峰，确认供试品溶液中马兜铃酸类化合物的特征峰，从而对供试品溶液中马兜铃酸类化合物成分进行定性。

定量方法：采用HPLC在相同色谱条件下分别测定供试品溶液和对照品溶液，将获得的供试品溶液的色谱图及其峰面积，按照内标法计算供试品溶液中马兜铃酸类化合物成分的含量。

此方法能完善含马兜铃酸类化合物的中药材的质量评价，而且还能为马兜铃酸类化合物安全性评价提供科学依据。