蛋白保护剂GH的应用

背景^[1-3]

蛋白保护剂GH是一种用于保护蛋白质的化合物。它可以与蛋白质形成稳定的复合物，防止蛋白质在高温、酸碱、有机溶剂等条件下被降解或失活。

蛋白保护剂GH通常由两部分组成：一部分是疏水性的脂肪酸或甘油三酯，可以与蛋白质的疏水性氨基酸残基相互作用，形成稳定的复合物；另一部分是亲水性的多糖或聚合物，可以与水分子相互作用，防止蛋白质在水中聚集沉淀。

蛋白保护剂GH广泛应用于生物技术、制药等领域。例如，在蛋白质纯化过程中，加入蛋白保护剂GH可以提高蛋白质的稳定性和纯度；在疫苗制备过程中，加入蛋白保护剂GH可以延长疫苗的保质期。

蛋白保护剂GH

蛋白保护剂GH是一种化学物质，具有以下特点：

1.是一种蛋白保护剂，可用于保护蛋白活性，降低本底并提高稳定作用。

2.通常以白色或淡黄色粉末的形式存在，具有较高的纯度。

3.通常用于液体和冻干酶的稳定，尤其适用于脲酶、尿酸氧化酶、甘油磷酸氧化酶等的稳定。

4.可降低本底并提高稳定作用，对于科研工作者的研究工作具有一定的帮助作用。

应用^[4-5]

蛋白保护剂GH可以用于细胞连接相关蛋白在皮肤低温损伤中的重要作用及低温保护剂的相关研究

研究皮肤低温储存与细胞连接相关蛋白的变化，从而分析其低温生物学效应，并将几种低温保护剂(cryoprotectant，CPA)进行比较，以期为探索低温组织保存液的有效成分提供科学依据。

方法：第一部分实验中，将皮肤组织采用不同的温度组(4℃组、-20℃组、-80℃组和-196℃组)进行保存，并在保存7天、14天、21天、28天后进行实验观察，设新鲜皮肤为对照组。参与细胞连接及信号转导的相关蛋白主要有：α-辅肌动蛋白(α-actinin)、纽蛋白(vinculin)。首先通过HE染色和免疫组织化学染色两种病理学方法在光镜下观察细胞形态和蛋白的改变，并用图像分析仪测定表皮组织中的含量变化。进一步采用RT-PCR和Western-blot对不同方法保存后的α-actinin、vinculin的含量进行了深入研究。力求从细胞连接结构的重要组成部分中寻找到低温损伤的位点，从而更深入了解抗低温损伤的机理。

第二部分从海藻糖对皮肤细胞连接相关蛋白的保护作用入手，探讨一种新型的CPA对低温储存皮肤活力的影响。实验将新鲜成人皮肤分为4组，分别经海藻糖／二甲基亚砜(T／D)、二甲基亚砜／丙二醇(D／P)、二甲基亚砜／去血清角质细胞培养液(D／K)、蛋白保护剂GH作为低温保护剂保存，-196℃液氮冻存7天、14天复温，设新鲜皮肤为对照组。采用组织病理HE染色、免疫组织化学染色、琥珀酸脱氢酶(SDH)测定方法，对各组间皮肤活力进行比较。并在此基础上，进一步采用RT-PCR和Western-blot方法对不同低温保护剂保存后皮肤的vinculin、α-actinin蛋白含量和基因水平进行了深入的研究。

结果：1、皮肤组织低温储存后其细胞连接相关蛋白vinculin、α-actinin形态结构及分布改变，并且蛋白含量下降，它们可能是低温损伤皮肤细胞连接结构的作用位点。

2、应用不同的温度储存皮肤得到不同的保存效果，在-196℃保存时细胞连接相关蛋白含量下降较少，形态改变不显著。

3、随着保存时间的延长，低温对细胞连接相关蛋白的损伤作用愈显著，-196℃组所保存的皮肤中细胞连接相关蛋白含量亦逐渐下降。

4、通过蛋白分析结果及皮肤活力的测定表明，海藻糖、蛋白保护剂GH在低温保存过程中，保护皮肤组织细胞连接相关蛋白，其中vinculin、α-actinin的蛋白含量和基因表达量与新鲜皮肤组相似。

5、海藻糖／二甲基亚砜组具有提高低温保存皮肤活力的作用，并优于传统保护剂组。

参考文献

[1]The role of galU and galE of Haemophilus parasuis SC096 in serum resistance and biofilm formation.Yi Zou;;Saixiang Feng;;Chenggang Xu;;Bin Zhang;;Suming Zhou;;Lingyun Zhang;;Xianhui He;;Jingyi Li;;Zhen Yang;;Ming Liao.Veterinary Microbiology,2013

[2]Construction and immune effect of Haemophilus parasuis DNA vaccine encoding glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase(GAPDH)in mice.Shulin Fu;;Minmin Zhang;;Jiwen Ou;;Huazhen Liu;;Chen Tan;;Jinlin Liu;;Huanchun Chen;;Weicheng Bei.Vaccine,2012

[3]Immunogenicity and protection against Haemophilus parasuis infection after vaccination with recombinant virulence associated trimeric autotransporters(VtaA).Alex Olvera;;Sonia Pina;;Marta Pérez-Simó;;Virginia Aragón;;Joaquim Segalés;;Albert Bensaid.Vaccine,2011

[4]Acute phase protein concentrations in colostrum-deprived pigs immunized with subunit and commercial vaccines against Gl?sser's disease.Sonia Martínez-Martínez;;Rafael Frandoloso;;César B.Gutiérrez-Martín;;Fermín Lampreave;;María JoséGarcía-Iglesias;;Claudia Pérez-Martínez;;Elías F.Rodríguez-Ferri.Veterinary Immunology and Immunopathology,2011

[5]于瑜.细胞连接相关蛋白在皮肤低温损伤中的重要作用及低温保护剂的相关研究[D].中国人民解放军军医进修学院,2007.