2'-O-甲基腺苷的一种合成方法

基本信息

2'-O-甲基腺苷，英文名：2'-O-Methyladenosine，CAS号：2140-79-6，分子量：281.268，密度：1.8±0.1 g/cm³，沸点：623.8±65.0°C at 760 mmHg，分子式：C₁₁H₁₅N₅O₄，熔点：200-202°C，为白色固体，2'-O-甲基腺苷是甲基化腺嘌呤的残基，在正常人群和腺苷脱氨基酶(ADA)的尿液中可被检测到。2'-O-甲基腺苷具有独特的降血压活性。

合成方法

将2-氨基-6-氯嘌呤核糖体1(5g，16.6mmol)用干燥的二甲基甲酰胺(100mL)溶液溶解，冷却至-20℃，再将氢化钠(0.44g， 18.2mmol)加入到上述溶液中搅拌。1小时后，在1小时内将溶于干燥的二氯甲烷(10 mL)的CH₃I (1.24mL，19.9mmol)滴入反应混合物中。黄色溶液在-20℃下再搅拌2小时，直到TLC(二氯甲烷:甲醇=9:1)显示起始原料反应完全。反应混合物用甲醇(20ml)淬灭，升至室温，减压浓缩。将残留物溶于水(200mL)，用二氯甲烷(3×200mL)萃取。用100mL水反提有机层。合并水相并浓缩，残留物用甲醇(7%~10%)和二氯甲烷柱层析分离纯化，得到3.4g(65%)的化合物2。或者纯化产物可以用乙腈的多次结晶来代替。

将化合物2(1.25g，3.96mmol)，4-二甲氨基吡啶(39mg，0.32mmol)和三乙胺(0.37mL，2.64mmol)溶于干燥的乙腈中，随后加入乙酸酐(0.9mL，9.5mmol)，室温下反应40分钟。然后用MeOH(10ml)淬灭，减压浓缩干燥。将残留物溶解于二氯甲烷中，用1%醋酸、饱和碳酸氢钠和盐水洗涤。有机层用无水硫酸钠干燥，干燥后浓缩得到产物3。另外，将残留物真空干燥3小时，溶解在干燥的THF中，用干氩气置换保护。在上述正压下的沸腾溶液中，逐渐滴加10eq的亚硝酸异戊酯。反应2小时后，真空除去溶剂，将残留物溶解于二氯甲烷中，用饱和NaHCO₃和盐水洗涤。有机相浓缩后经快速柱层析纯化。用正己烷-乙酸乙酯(1:1)混合物洗脱，得到1.1g(72%)化合物4为黄色油状物。

化合物4(0.45g, 1.17mmol)溶于饱和甲醇氨溶液(20mL)中，125℃高压灭菌4小时。溶剂在真空中除去，剩余残留物在硅胶柱上纯化。用二氯甲烷-甲醇(9:1)混合物洗脱，得到0.25g(80%)的2′-O-甲基腺苷5为白色固体。

参考文献

[1]Xie, L.-J., Yang, X.-T., Wang, R.-L., Cheng, H.-P., Li, Z.-Y., Liu, L., … Cheng, L. (2019). Identification of Flavin Mononucleotide as Cell-Active Artificial N6-Methyladenosine RNA Demethylase. Angewandte Chemie International Edition.