酶催化合成N-乙酰-L-4-羟基脯氨酸

发布日期:2023/9/13 8:45:19

背景技术

N‑乙酰‑L‑4‑羟基脯氨酸，又称乙酰基羟脯氨酸，分子式：C₇H₁₁NO₄，CAS登录号33996‑33‑7，胶原蛋白中含有约10％的羟基脯氨酸，N‑乙酰‑L‑4‑羟基脯氨酸是乙酰化修饰过的氨基酸衍生物，是一种具有屏障保护作用的化妆品或准药品原料。乙酰羟基脯氨酸具有长效保湿、促进神经酰胺合成、缓解特应性皮炎患者瘙痒、修复皮肤细纹、促进胶原蛋白合成、增强皮肤渗透性等功效。在化妆品行业，主要用于抗衰老、抗皱、保湿。在医药行业里，N‑乙酰‑L‑4‑羟基脯氨酸作为一种氨基酸衍生物，经大量临床前及临床试验验证，具有显著的抗炎作用，并优于目前临床广泛应用的NSAIDs，用于治疗骨关节炎和类风湿性关节炎，缓解疼痛和四肢僵直，并且显示出较好的胃肠安全性，在德国和法国广泛应用已有20余年的时间。

对于N‑乙酰‑L‑4‑羟基脯氨酸的合成，目前公开的文献基本采用化学合成的方法，本文将提供一种生物酶催化的N‑乙酰‑L‑4‑羟基脯氨酸的合成方法。该方法的特点在于使用酰基转移酶催化羟基脯氨酸发生酯交换反应，从而合成N‑乙酰‑L‑4‑羟基脯氨酸。该方法操作简便，试剂廉价易得，具有良好的工业应用前景。

合成方法

于500mL三口烧瓶中，依次加入0.1M pH8.0PBS缓冲溶液200mL，酰基转移酶MsAcT 0.5克，羟基脯氨酸10克，乙酸乙酯11克，于25℃，200rpm搅拌桨搅拌，0.01MPa氮气吹扫的条件下，反应24h，HPLC检测转化率95％。加入盐酸调节pH至3‑5，硅藻土过滤，加入等体积二氯甲烷萃取两次，旋转蒸发得到产物N‑乙酰‑L‑4‑羟基脯氨酸12克，纯度98％。

N-乙酰-L-4-羟基脯氨酸合成路线