格列风内酯的制备方法

背景及概述^[1][2]

天葵是毛莨科天葵属植物，为多年生草本，块根肉质，天葵子味甘、苦，性寒，有小毒；具清热解毒，消肿散结之功效；用于瘰疠、臃肿、疔疮、跌打损伤、毒蛇咬伤等症。现代药理实验表明，天葵子对金黄色葡萄球菌等有抑制作用；临床上用天葵子或其复方治疗急性软组织损伤及骨关节结核、急性乳腺炎、子宫肌瘤、原发性肝癌、胃癌等。格列风内酯(Griffonilide) 是天葵子的主要有效成分之一，也具有广泛的药理活性。

结构

应用^[1]

药理研究表明格列风内酯具有显著的抗炎活性，对炎症的抑制率高达64％。

制备方法^[1-2]

方法1：一种格列风内酯单体的分离纯化方法，其特征在于包括以下步骤：

1)提取：取天葵子药材粉碎成粗粉，加60‑85％乙醇微波提取10‑60分钟，提取2‑5 次，合并提取液，浓缩得浸膏；

2)碱溶酸沉：将上述浸膏加碱水分散，搅拌均匀，过滤，滤液再加酸水调至pH4‑5，用乙酸乙酯萃取，萃取液浓缩后得到天葵子总内酯浸膏；

3)氧化铝柱层析：将上述浓缩液与1‑1.5倍150‑200目中性氧化铝拌混均匀，再用新鲜的中性氧化铝上柱，拌混氧化铝装于其上，以混合有机溶剂洗脱，收集洗脱液，回收试剂，得到格列风内酯浓缩液；

4)重结晶：将格列风内酯浓缩液置于结晶罐中静置8‑24小时使其结晶，离心使格列风内酯晶体与母液分离，用二氯甲烷‑甲醇重结晶，得到纯度为95％以上的格列风内酯。

方法2：(1)以天葵子鲜品或干品为原料，切碎，用提取溶媒 (水、甲醇、乙醇、丙酮中的一种或与水任意比例混合溶剂)行提取，所得提取液除去溶剂后得到天葵提取物，纯化步骤为用适量水分散，非极性溶剂除去色素，该非极性溶剂为正己烷、环己烷、石油醚、乙醚、二氯甲烷或三氯甲烷，用溶剂萃取，萃取液浓缩后除去该萃取用溶剂，得天葵提取物纯化物；或用适量甲醇溶解，上大孔吸附树脂，先用蒸馏水洗脱，然 后用20％的甲醇或乙醇溶液洗脱，再用含甲醇或乙醇20‑90％的水溶液进行洗脱，收集洗脱液， 除去溶剂，得天葵提取物纯化物；或用适量粗硅胶或氧化铝拌样，进行柱层析，用有机溶剂洗脱，除色素。

方法3：以天葵子药材粗粉为原料，5倍量95％乙醇加热回流提取3次，每次3h，合并提取液，回收乙醇，得乙醇浸膏，取浸膏悬浮于水中，用醋酸乙酯和正丁醇萃取，蒸干溶剂，硅胶柱色谱分离，氯仿‑甲醇系统梯度洗脱，氯仿‑甲醇(100∶8)洗脱流分浓缩析晶，结晶漏斗抽滤，甲醇重结晶得到格列风内酯。

方法4：从天葵子中提取格列风内酯和东方唐松草苷的方法，其特征是方法步骤为：用70‑100％ 的甲醇溶液提取，过滤，得提取液，加入硅藻上搅拌脱色，脱色液加入截留分子量6000‑10000 的中空复合膜超滤，透过液减压浓缩，浓缩液用水分散，加入大孔吸附树脂柱层析吸附1‑3 次，吸附结束后，用含水乙醇梯度洗脱，分别收集富集格列风内酯和东方唐松草苷的流分，再分别减压浓缩得到粗浸膏；将格列风内酯粗浸膏与聚酰胺拌样进行柱层析，先用氯仿洗脱， 再用氯仿‑甲醇(10∶1)洗脱，收集洗脱液，浓缩析晶，粗晶用甲醇‑丙酮重结晶得到格列风内酯纯品。

主要参考资料

[1] CN201110045363.3 从天葵子中提取格列风内酯和东方唐松草苷的方法

[2] CN201110045355.9 一种格列风内酯单体的分离纯化方法