苯甲酰新乌头原碱的应用

背景及概述^[1]

乌头为毛茛科植物乌头的子根的加工品，川乌、草乌为乌头的干燥母根。附子为毛莨科植物乌头的子根，是常用中药，具有止痛、利尿、强心促进新陈代谢等作用。乌头块根(母根)含乌头碱，次乌头碱，新乌头碱，塔拉胺，消旋去甲基衡州乌药碱，异塔拉定，新乌宁碱，准噶尔乌头碱，附子宁碱，去甲猪毛菜碱，异飞燕草碱，苯甲酰新乌头碱，多根乌头碱，森布星A，森布星B，14-乙酰塔拉胺，脂乌头碱，脂次乌头碱，脂去氧乌头碱，脂中乌头碱，北草乌碱，川附宁，3-去氧乌头碱，惰碱，荷克布星A及B，尿嘧啶，乌头多糖A、B、C、D。

附子中含有的生物碱有乌头碱、新乌头碱、次乌头碱、北乌碱、苯甲酰新乌头原碱和苯甲酰次乌头原碱，dl-去甲乌药碱，川乌碱甲，川乌碱乙，卡乌碱，昆常碱，去甲猪毛菜碱，异翠雀碱，得美沙乌头碱，海帕乌头碱，尼奥灵，准葛尔乌头碱，新江油乌头碱，华北乌头碱，黄草乌头碱等等。附子中的双酯型生物碱：乌头碱、新乌头碱、次乌头碱是附子中的活性成分也是其毒性成分，用药前需炮制解毒，在炮制过程中将其14 位的乙酰基去掉得到相应的单酯型生物碱：苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰去氧乌头原碱达到解毒的效果，炮制过后的附子称为制附子，其中苯甲酰新乌头原碱是其中重要的活性成分。

应用^[2-3]

药理学研究表明，苯甲酰新乌头原碱具有明显的抗炎止痛作用。此外，国内有关发现苯甲酰新乌头原碱能抑制人白血病细胞K562 细胞增殖并使其凋亡，凋亡率呈浓度和时间依赖。有研究探究苯甲酰新乌头原碱对骨髓瘤细胞RPMI8226(RPMI8226)增殖及凋亡的影响。将对数期生长RPMI8226细胞随机分为空白对照组、苯甲酰新乌头原碱(0. 1、0. 5、1、10、100μmo L)组，24 h后用CCK8测定各组光密度(A)，根据A值计算出半数抑制质量浓度(IC50)；根据所测IC50将对数期生长RPMI8226细胞分为空白对照组、阴性对照组、苯甲酰新乌头原碱(4、6、8μmo L)各组，作用12～48 h，用CCK8测定不同作用时间下各组RPMI8226细胞A值，计算出各组增殖抑制率；根据苯甲酰新乌头原碱对RMPI8226增殖抑制率的影响规律再设空白对照组、苯甲酰新乌头原碱(4、8μmo L)组，作用24、48 h，用Annexin V/PI双染色流式细胞术检测各组细胞凋亡率.结果显示作用24 h后，各组苯甲酰新乌头原碱换算成质量浓度，在13～13 000 ng/m L(即1～10μmo L)质量浓度，各组A值随药物质量浓度的增加而减少，P <0. 05，其IC50质量浓度为1 040 ng/m L；作用12～48 h，各组细胞增殖抑制率随加入的苯甲酰新乌头原碱的增加、作用时间的增加而增加，各组P <0. 05；作用24、48 h后各组细胞凋亡率随加入苯甲酰新乌头原碱的增加、作用的增加而增大，各组P <0. 05.结论：苯甲酰新乌头原碱能抑制RPMI8226增殖并使其凋亡。

另外，苯甲酰乌头原碱配伍芍药苷可增加苯甲酰乌头原碱、芍药苷抗炎镇痛作用；苯甲酰乌头原碱配伍芍药苷可增加苯甲酰乌头原碱、芍药苷治疗类风湿关节炎的药效作用，其作用机制可能主要与抑制血清PGE2的产生，调节血清细胞因子(IL-1β、TNF-α和VEGF)，抑制Ig G的合成与分泌，调控JAK-STAT信号通路中STAT1和STAT3的表达，抑制滑膜细胞异常的分泌和增生相关。

制备^[1]

一种高纯度苯甲酰新乌头原碱的制备方法，其采用高速逆流色谱技术，包括以下步骤：

1)制备含苯甲酰新乌头原碱的粗提物作为进样物，该粗提物是乌头属粗提物(如可以是生附子粗取物、制附子粗提物或乌头粗提物)；

2)配制构成固定相、流动相的溶剂体系，该溶剂体系由组分A、组分B和组分C构成，其中，组分A为氯代烷烃，组分B为脂肪醇，组分C为水、碱性溶剂或酸性溶剂，组分A、组分B、组分C的体积比依次为(2-5)∶(0-5)∶(1-5)，将该溶剂体系混匀静置分层后，以上相为固定相，下相为流动相，该固定相、流动相均可用于经过一次分离从乌头属粗提物中分离苯甲酰新乌头原碱组分；

3)使逆流色谱仪柱子中充满固定相；

4)然后使其主机转动，再将流动相泵入柱内，或是固定相和流动相同时泵入柱内，再转主机；

5)由进样阀进样，根据检测器图谱接收目标成分，经分离后得到苯甲酰新乌头原碱。

主要参考资料

[1]  CN200810208203.4 高纯度苯甲酰新乌头原碱的制备方法

[2] 苯甲酰新乌头原碱对骨髓瘤细胞RPMI8226增殖及凋亡的影响

[3] 苯甲酰乌头原碱配伍芍药苷治疗类风湿关节炎的药效学及作用机制研究