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Mag-Beads GST融合蛋白纯化磁珠的研究进展

发布日期:2020/1/1 10:28:37

免疫磁珠技术[1]

免疫磁珠由载体微球和免疫配基结合而成,载体微球的核心是金属小颗粒,核心外包裹着一层高分子材料,最外层是功能层,如氨基、羧基、羟基。磁珠具有超顺磁性。超顺磁性由粒子的量子效应产生,使磁珠不会被磁化。由于磁珠足够小,因而可以悬浮在液体中保持相当长的时间不聚沉。直径大于 1 μm 的磁珠可以用普通磁铁分离,而直径小于 1 μm 的需要高强度磁场的磁性分离器分离。

无机磁珠需要在其表面进行高分子有机合成、生物合成或多孔玻璃反应包覆配体才能用作生物分离用。修饰磁珠表面的配体可以对目的蛋白质进行亲和吸附以达到分离的结果。链亲和素,抗体,A 蛋白,G 蛋白等是经常用作蛋白分离的配体。磁珠表面的配体可暴露产生的-COOH,-OH,-NH2 等功能基团与蛋白质上的相应基团反应而使蛋白耦联即可发生固定化反应。在实验室中还可以将磁珠表面硅烷化,再将配体与其偶联后固定化酶,这样可使酶的活性不至于暴露于无机铁氧体而降低。近年来非球形的磁性材料诸如磁性纳米管也已被鉴定出可以用于特定蛋白的吸附分离。

GST融合蛋白

融合标签技术广泛用于基因工程研究,蛋白质的表达经常用到各种融合表达系统。谷胱甘肽巯基转移酶(GST),基因融合表达体系具有较高的蛋白表达效率,表达产物纯化方便且利于相关抗体的制备,是目前应用最为广泛的亲和标签之一。

Mag-Beads GST融合蛋白纯化磁珠研究进展[2]

目前国外已有公司研制出了用于纯化融合蛋白的磁性微粒并得到了实际应用,但价格都比较高,国内尚不能制备高质量的。世纪年代以来国内科研人员不断探索和尝试,在其研究领域内制备各自所需。朱颇安等,应用材料学和免疫学的新技术在国内首次研制成功,与国外同类产品进行相关试验比较后认为自制符合质量控制要求,也因此自制获得了国家专利,并被评为年度武汉市十大科技成果之一。王海青等制备出用于癌症标志物早期诊断的,并对其进行了评价。张蓉蓉,李树清等分别以分离猪胸膜肺炎放线杆菌,发现可以显著提高此病原菌的分离效率。李鹤等采用化学沉淀法与球磨法制备磁性微球,并采用反相悬浮包埋法制备一,为从猪血清中分离纯化开辟了一条新的途径。

参考文献

[1] Sang  Jun  Son,  Jonathan  Reichel,  Bo  He,  et  al.  Magnetic  nanotubes  for

magnetic-field-assisted  bioseparation,biointeraction  and  drug  delivery[J].

[2] GST抗体包被免疫磁珠纳米佐剂的初步研究

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