Protein A/G/L的应用
发布日期:2019/12/30 8:29:01
背景[1]
金黄色葡萄球菌蛋白 A(Staphylococcal proteinA, SPA)、链球菌(C 和 G 群)蛋白 G(Streptococcal protein G, SPG)和大消化链球菌蛋白 L(Peptostreptococcus protein L, PPL)是典型的免疫球蛋白结合蛋白。它们能结合大多数哺乳动物的免疫球蛋白,但结合方式和结合谱不同。三种蛋白可以优势互补,不仅有更好的结合能力,还具有更广的结合谱,有很好的应用前景。
应用[2]
蛋白 A、蛋白 G、蛋白 L 都是免疫球蛋白结合分子,这类分子对哺乳动物Ig上的特殊位点表现出很强的亲和性。尽管这些分子的精确功能还没有完全为人们所知,但它在细菌的致病性方面扮演着重要的角色。常见的细菌病原体金黄色葡萄球菌产生一个 42KDa 的毒力因子蛋白 A(SPA),包含五个高度同源性的胞外 Ig 结合区域即 E、D、A、B 和 C。链球菌蛋白 G(SPG)包含两个到三个结合哺乳动物 Ig 恒定区 Fc 部位的结构域。与蛋白 A 和蛋白 G 不同,蛋白 L(PPL)只结合哺乳动物κ型 Ig 轻链。三种蛋白在结构和功能上有相似和不同之处,每种蛋白都不能单独和所有哺乳动物 Ig 结合。蛋白 A,蛋白 G,蛋白 L 的单个结构域已被证实有结合Ig的功能。
重组Protein A/G/L基因构建目的[2]
Protein A/G/L Ig 结合蛋白(SPA、SPG、PPL)可结合多种哺乳动物的 Ig,据此原理已开发出商品化的可检测多物种的布鲁氏菌病 ELISA。口蹄疫可感染多种有蹄类哺乳动物,并且现在也需要一种能够同时检测多种动物口蹄疫感染的通用 ELISA 方法。
研究旨在将 SPA、SPG和 PPL 的单结构域基因优化、人工合成,使其在大肠杆菌中实现可溶性融合串联表达,将优选出的重组蛋白纯化、标记,标记产物经 Western blot、ELISA 检测,可与多物哺乳动物免疫球蛋白结合,可作为哺乳动物血清学检测中的通用抗体,替代抗免疫球蛋白抗体运用到哺乳动物抗体检测方法中,并建立一种多物种通用口蹄疫检测方法。不但实现对牛、猪、羊、鹿口蹄疫感染进行通用检测,还为多种动物共患传染病的监测和防控提供方便、可靠的技术支持。
参考文献
[1] 串联表达蛋白A/G/LIg结合结构域及其在口蹄疫鉴别诊断中的应用
[2] YANG HUA, CAO JIE, LI LIAN-QING et al. Evolutional selection of a combinatorial phagelibrary displaying randomly-rearranged various single domains of immunoglobulin (Ig)-binding proteins (IBPs) with four kinds of Ig molecules[J]. BMC Microbiology, 2008, 8(137):1471-1478.
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